红细胞脆性试验

常用的红细胞脆性试验，有渗透性脆性试验和机械性脆性试验两类。
渗透性脆性试验 利用红细胞在低渗溶液中，由于水分进入使之胀大、脆裂发生溶血的原理，将红细胞加入到一组不同浓度的低渗氯化钠溶液中，观察其溶血程度，以判定红细胞抵抗低渗溶液的能力，并用开始溶血和完全溶血时的氯化钠浓度表示，即称为红细胞渗透性脆性试验。红细胞的脆性与其厚径直接相关，厚径越大，脆性越高，厚径越小，脆性越低。主要用于协助诊断某些溶血性贫血。测定方法一般有半定量法和定量法二种。半定量法： 是以蒸馏水将0.5%氯化钠溶液稀释成一系列不同浓度，于各管内加入新鲜血液一滴，充分混匀，在室温静置2h，直接观察试管上清液的颜色及管底沉淀。若上清液显微红色，管底有多量红细胞，为开始溶血的氯化钠浓度；全管呈红色，管底无红细胞沉淀者，为完全溶血的氯化钠浓度。用同法作正常对照。正常值开始溶血为0.44%～0.42%氯化钠溶液；完全溶血为0.34～0.32%氯化钠溶液。结果如较正常值相差0.02～0.04%即有意义。定量法：是以蒸馏水将1%氯化钠溶液稀释成0.10～0.85%的不同浓度，每管总量5.0ml，各管再加入肝素抗凝血或脱纤维蛋白血5μl，混匀，在室温静置半小时，再混匀后，各管离心沉淀5min，取上清液以540或545nm波长比色。以0.85%氯化钠溶液管为空白，0.1%氯化钠溶液管为100%溶血，计算溶血率，以溶血%数为纵轴，氯化钠浓度为横轴，绘制溶血曲线报告结果。红细胞温育后渗透性脆性试验： 用肝素抗凝血或脱纤维蛋白原血，将标本置37℃温育24h，再按上法测定开始溶血或完全溶血的氯化钠溶液浓度。一般常将抗凝血标本分为两份，一做定量法红细胞渗透脆性试验；一做红细胞温育后脆性试验。两法结合使用，可提高诊断水平。渗透性脆性增高，见于遗传性球形红细胞增多症。增高的程度，取决于球形红细胞数量的多少，数量越多越易呈阳性反应；球形红细胞数量少时，渗透脆性试验结果可以正常，此时做温育后的红细胞脆性试验，渗透脆性增高较为明显。这是由于红细胞在温育过程中，大大提高了能量的需要量，由于红细胞膜酶的缺陷，不能使离子泵获得足够的能量以维持功能，因而促进了溶血。某些自身免疫性贫血，因伴有球形红细胞增多，也可有渗透脆性增高。遗传性丙酮酸激酶缺乏症的非球形红细胞溶血症，温育后的渗透脆性试验明显增高。渗透脆性减低，见于地中海贫血、严重的缺铁性贫血及某些肝脏疾患。
红细胞机械脆性试验 本试验可间接地了解红细胞在体循环内流动时耐受机械性破坏的程度。本法是将肝素抗凝血置于有玻璃小珠的三角烧瓶中，将瓶固定于旋转盘或特制的振荡器上，以一定的转速或振动频率旋转，振荡1h以上，然后吸取少量血液，分别加入蒸馏水和1.25%氯化钠溶液，离心取上清液，以蒸馏水为空白，进行比色，计算溶血百分率。若先将标本经37℃温育12h，可提高机械脆性试验的敏感性。正常值是根据测定时的转速或振荡频率、玻璃小珠的数量和大小而不同，溶血率正常值为7.5～23.9%。每次试验需作正常对照。
凡红细胞渗透脆性试验阳性者，机械脆性试验的溶血百分数也明显增高。镰状红细胞、凝聚的红细胞、新生儿的红细胞和红细胞比积增高和碱性的血液标本，机械性脆性试验的溶血百分数均增高。

红细胞脆性试验erythrocyte osmotic fragility test

用来测定先天性红细胞膜缺陷的一种试验方法。用来观察红细胞对一系列低渗氯化钠溶液抵抗力的试验，即红细胞开始发生溶血与完全溶血的界限。应当配制116.3～41.2mmol/L(0. 68～0.24)12个不同浓度的氯化钠溶液管。于患者床前用16号针头取血约1ml，立即滴于各管内，室温2h观察开始溶血及完全溶血的氯化钠浓度，从而得出被检红细胞的脆性试验结果。正常参考值：开始溶血为7 8.66～64.98mmol/L(0.46～0.38)；完全溶血为6 1.56～47.88mmol/L(0.36～0.28)。脆性增加主要 见于遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血、其他溶血性贫血等。红细胞脆性减低可见于恶性贫血、红血病、镰状红细胞贫血、低色素性贫血、梗阻性黄疸及脾切除后等。几种疾病的脆性试验结果见下表。

几种疾病脆性试验结果