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最有效的灭菌法。将蒸锅密封紧闭，用热蒸汽加压至15镑(约121.3℃)维持15—30分钟，杀死包括芽孢在内的一切微生物，适用于耐高温、耐水物品的消毒灭菌。如普通培养基、敷料等。所用蒸锅称“高压蒸汽灭菌器”或“高压蒸锅”，是微生物学实验室和医疗防疫机构等常用的一种灭菌器。
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