(2)棉籽、植株和土壤中残留量检测方法

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天津市农业科学院中心实验室 郭永泽 张玉婷 刘凤来 宋淑荣 石守良

棉花植株用苯提取，棉籽用丙酮／石油醚提取、土壤用二氯甲烷提取，中性氧化铝和弗罗里硅土柱层析净化后，气相色谱法(ECD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

样品粉碎机

空气浴振荡器

旋转蒸发器

层析柱

2．主要试剂

石油醚(60～90℃，重蒸)、丙酮(重蒸)、乙酸乙酯(重蒸)、苯(重蒸)、正己烷(重蒸)、二氯甲烷(重蒸)

中性氧化铝 200～300目，120℃处理5～6h

弗罗里硅土 60～80目，130℃处理5h

高效氯氰菊酯标准品

3．检测步骤

3．1 棉籽

3．1．1 提取

称取20g样本，加130mL丙酮／石油醚(1∶1，V／V)振荡提取30min，抽滤并洗涤，合并滤液。

3．1．2 净化

3．1．2．1 液-液分配

将滤液转移至分液漏斗中，加150mL2%硫酸钠溶液振荡，静置分层后收集石油醚。水相再用30mL×2石油醚萃取，合并石油醚相并经无水硫酸钠脱水、浓缩并定容至适当体积。用等体积的丙酮／水(85∶15，V／V)溶液进行液-液分配3次。合并水相，按其1／2的体积量加水。用30mL×3石油醚萃取，合并石油醚相，经无水硫酸钠干燥后，浓缩至约5mL，待柱层析净化。

3．1．2．2 柱层析净化

层析柱中依次加入2cm无水硫酸钠、10g弗罗里硅土和2cm无水硫酸钠，将浓缩液转移至柱中，用70mL石油醚／丙酮(19∶1，V／V)洗脱，弃去前20mL，收集后50mL，浓缩至近干，定容后待测。

3．2 植株

3．2．1 提取

称取20g样本，加50mL苯，振荡提取1h，抽滤。残渣用30mL×3苯洗涤。合并滤液，经无水硫酸钠干燥后，浓缩至约5mL。

3．2．2 净化

层析柱中依次加入2cm无水硫酸钠、7g中性氧化铝、5g弗罗里硅土和2cm无水硫酸钠，用40mL苯预淋。将提取浓缩液转移至柱中，用70mL苯／乙酸乙酯(20∶1，V／V)洗脱。收集全部洗脱液，浓缩至近干，定容后待测。

3．3 土壤

3．3．1 提取

称取20g样本，加50mL二氯甲烷，振荡提取4h，抽滤，用提取液洗涤残渣。合并滤液并浓缩至近干，用5mL丙酮／石油醚(1∶1，V／V)溶解。

3．3．2 净化

层析柱上下两端各加2cm无水硫酸钠，中间加7g中性氧化铝和5g弗罗里硅土，用苯预淋。将提取浓缩液转移至柱中，用苯／乙酸乙酯(95∶5，V／V)洗脱，收集50ml洗脱液，浓缩至近干，定容后待测。

3．4 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 15m×0．32mm

检测温度 柱温260℃；进样口280℃；检测器280℃

载气 氮气，1mL／min

分流比 15∶1

保留时间 1．84min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 6．4×10^－12g。

最低检测浓度 棉籽、植株和土壤均为0．0013mg／kg。

回收率 棉花植株、棉籽、土壤中添加高效氯氰菊酯0．02～1．00mg／kg时，平均回收率分别为83．3%～92．5%、88．4%～95．2%和87．8%～89．4%。见表1-14-2。

相对标准偏差 1．0%～8．6%，见表1-14-2。

表1-14-2 棉花植株、棉籽和土壤中高效氯氰菊酯添加回收率及相对标准偏差实验结果