免疫电镜技术immunosorbent electron microscope,ISEM

在电子显微镜下观察抗原抗体反应的检测方法。常用在植物病毒、类菌原体病害或类细菌病害的检测中。免疫电镜有3种基本方法：
❶诱集法。首先将抗血清吸附在电镜铜网的支持膜上，再从病毒制备物中吸附抗原，铜网上的抗体可捕捉到大量的病毒粒子。
❷凝聚法。抗血清与病毒制备物混合后，用铜网吸附。
❸抗体包被法。亦称修饰法。铜网吸附抗体后再吸附抗原，然后再一次吸附抗体。抗体包被法除能诱集较多的抗原外，病毒粒子周围被抗体分子包被，增强了直观性，电镜下易于观察。修饰法除用于病毒的鉴定和检测外，还可用于研究病毒间的相互关系。

免疫电镜技术immunoele ctronmicroscopy

系先进的生物学检测技术之一。方法是采用生物素(Biotin)标记抗体或通过一种反应衍生物直接附着到细胞表面功能基因，然后与铁蛋白标记的抗生物蛋白(Avidin)相互作用。由于铁蛋白颗粒致密，不能被电子通过，因而可用电镜观察，此为直接生物素-抗生物蛋白BA标记电镜法。另一种方法是用铁蛋白标记生物素，反应过程中，当抗生物蛋白与生物素标记的抗体作用后，再加铁蛋白标记的生物素，故称为生物素-抗生物素蛋白-生物素(BAB)直接电镜法。这些方法主要用于组织化学定位研究。

免疫电镜技术

免疫电镜技术是指抗原在分子水平与其相应标记的抗体起反应并用电子显微镜进行观察的一种技术。作为免疫电镜技术的理想标记物质，应具备以下三个条件：
❶标记物和抗体应等价且能稳定结合。在制备标记物和抗体的结合物过程中，既要保持抗体的免疫学活性又要保持标记物的活性或损失较小。
❷标记物应具有充分的散射电子的能力，标记后的结合物的分子量应越小越好。因分子量越小越易穿透组织，有利于细胞内抗原的定位。
❸标记的抗体与生物样品发生反应后，经电镜样品的一系列制备过程，其性质仍稳定不变。实际操作上难以完全满足以上三个条件。常用的标记物质有汞、铀等，但一般多采用铁蛋白和过氧化物酶。酶的应用在近年来正日趋广泛。现以免疫铁蛋白技术为例简介如下。
免疫铁蛋白技术 铁蛋白可通过低分子量的双功能试剂例如二异氰酸间二甲苯等与抗体球蛋白结合。应用高电子密度的铁蛋白标记的抗体分子结合到待测的抗原上，再在电镜下观察与它相结合的抗原决定簇的位置。免疫铁蛋白技术可分为直接法和间接法两种。直接法是将标记的特异性抗体直接与标本上的相应抗原反应； 间接法是先将未标记的抗体 （第一抗体） 加到标本的抗原上，再加上标记的抗球蛋白抗体（第二抗体）来间接进行抗原的定位。由于铁蛋白的分子量太大(690,000)，难于进入细胞，故免疫铁蛋白技术只适合于细胞表面抗原的定位。