农药藻类毒性toxicity of pesticides to algae

农药对藻类细胞造成损害的能力，表现为对藻类的毒杀和生长抑制两种损害作用，以半数生物受影响的浓度EC50表示。藻类是自然水体中分布最广泛的生物类群。在水生生态系统中藻类作为初级生产者是水生食物链的基础。因此，农药对藻类生长的影响是评价农药对环境安全性的一项重要指标。
毒性试验 包括准备和试验两个阶段。
准备阶段 包括藻种、药品、水、器具和预试等方面。❶国际上供农药毒性试验用的藻种有月芽藻(Selenastrum bibraianum)、栅列藻(Scenedesmus)、小球藻(Chlorella vulgaris)等。在中国，这些藻种都分布广泛，但常用栅列藻作为试验藻种。藻种应先经鉴别、分离、纯化，获得纯种。试验前将藻种用无菌操作转接到盛有水生六号培养液的容器内，置于20～25℃，光照度为4000勒±10%的条件下振荡培养或通气培养。隔96小时移种一次，反复2～3次，使藻类基本上达到同步生长阶段。将藻液搅匀取样，在显微镜下用血球计数板计数，调节藻液的细胞密度到105个/毫升，以此作为试验用的藻种母液。
❷供试农药可用纯品或制剂，药液用无菌蒸馏水配制，难溶于水的农药可用少量(<0.1毫升/升)丙酮或吐温-80助溶。
❸试验用的玻璃器具均需高温灭菌。以水生六号培养液为试验用水，pH 7.5±0.2。
❹预试。求出农药对藻种全抑制最低浓度与无抑制最高浓度。
试验阶段 包括分组、染毒、观测、计算等步骤。在预试求得的农药最低与最高浓度的大致范围内，按级差设5～7个试验浓度组，每个浓度组设两个重复，并设一组空白对照。
每个试验处理中，在100毫升烧杯内加40毫升藻种母液、9毫升水生六号培养液和1毫升不同浓度的药液，搅匀后分别计数。
在前述温度及光照条件下进行培养，试验期为4天。从培养的24小时起到48、72、96小时定时取样计数，取样前必须先将藻液充分搅匀，详细记录在显微镜下观察到的藻体与藻数的变化情况。每组每次观察两个片子，取平均值。
藻类在适宜的条件下繁殖很快，栅列藻每个细胞都可分裂成四个子细胞，细胞数的增减标志着藻类生长的快慢与生长受促或被抑的状况。根据记录，按下列公式求出农药对藻类生长的抑制百分率：

然后经统计分析，求出EC₅₀值与其95%可信限。
毒性评价 目前尚无农药对藻类毒性等级划分的统一标准，现在使用的一种参考性标准是以96小时的EC₅₀大小划分的：
低毒级 EC₅₀>3.0毫克/升
中毒级 EC₅₀ 3.0～0.3毫克/升
高毒级 EC₅₀ <0.3毫克/升
部分农药对藻类的毒性如下表：

农药对藻类的毒性与评价

农 药	96小时的EC50(mg/L)	毒性等级
溴氰菊酯 氟氰菊酯 嘧啶氧磷 甲基异柳磷 克草胺 克百威 氰戊菊酯 氟胺氰菊酯 甲基对硫磷 敌 稗 单甲脒	0.15 0.23 0.26 0.58 1.34 2.97 3.93 4.71 6.36 7.75 7.84	高毒 高毒 高毒 中毒 中毒 中毒 低毒 低毒 低毒 低毒 低毒