(1)黄瓜和土壤中残留量检测方法

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中国科学院上海昆虫研究所 徐乃旭 陈问达

样本用乙酸乙酯提取，活性炭／硅藻土柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

旋转蒸发器

层析柱 Φ15mm×180mm

组织捣碎机

大容量离心机

2．主要试剂

甲醇(HPLC级)、乙酸乙酯(重蒸)、三氯甲烷(重蒸)、磷酸、磷酸二氢钾、无水硫酸钠、弗罗里硅土、活性炭(黑色无定形粉末)、硅藻土(100～120目)

缓冲溶液(pH≈2) 500mL0．01mol／L磷酸二氢钾中加入0．1mL磷酸

噁唑菌酮标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 黄瓜

称取200g样本用150mL乙酸乙酯组织捣碎提取。加20g硅藻土搅拌混合，过滤。再用100mL乙酸乙酯分两次洗涤残渣，合并滤液。

3．1．2 土壤

称取50g样本，加30mL蒸馏水湿润，再加入100mL乙酸乙酯浸泡过夜，过滤。再用50mL乙酸乙酯洗涤残渣，合并滤液。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将样本滤液中的乙酸乙酯分出后，水相再用50mL乙酸乙酯(土壤样本用20mL)萃取1次。合并乙酸乙酯相，经无水硫酸钠干燥。取相当于50g样本的乙酸乙酯提取液，用旋转蒸发器浓缩至近干。用3mL三氯甲烷溶解残余物，待柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、5g活性炭／硅藻土(1∶1，W／W)和2cm无水硫酸钠，用50mL三氯甲烷预淋。将样本的三氯甲烷溶液移入层析柱中，用55mL三氯甲烷溶剂淋洗。弃去前5mL流出液，收集其余的洗脱液，用旋转蒸发器浓缩至近干，再加入约3mL甲醇继续浓缩至近干。用甲醇溶解残余物并定容至10mL，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 254nm

色谱柱 BONDAPAK^TMC₁₈ Φ3．9mm×30cm不锈钢柱

流动相 甲醇／缓冲液(4∶1，V／V)

流速 1．0mL／min

进样量 20μL

保留时间 9．2min

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 2×10^－9g。

最低检测浓度0．02mg／kg。

回收率 黄瓜、土壤中添加噁唑菌酮0．5～5．0mg／kg时，平均回收率分别为85．4%～95．8%和84．4%～101．9%，见表2-8-1。

相对标准偏差 2．6%～16．6%，见表2-8-1。

表2-8-1 黄瓜和土壤中噁唑菌酮添加回收率及相对标准偏差实验结果