(1)花生仁、壳、植株和土壤中残留量检测方法

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中国农业科学院烟草研究所 冯涛 曹爱华 徐光军 刘保安

样品用水和丙酮提取，石油醚液-液分配，混合柱层析净化，气相色谱法(ECD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

匀浆机

超声波振荡器

旋转蒸发器

层析柱 Φ12mm×300mm

2．主要试剂

丙酮(重蒸)、石油醚(重蒸)、乙酸乙酯(重蒸)、氯化钠、无水硫酸钠、弗罗里硅土、活性炭、中性氧化铝

乙草胺标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 花生仁、壳和花生秧

称取25g粉碎样本于250mL具塞三角瓶中，加入20mL蒸馏水，用80mL、40mL丙酮超声波振荡提取，每次20min，过滤。残渣再用30mL丙酮分两次洗涤、过滤。

3．1．2 土壤

称取50g样本于250mL具塞三角瓶中，加入20mL蒸馏水，用80mL丙酮超声波振荡提取30min，过滤。残渣用50mL丙酮分3次洗涤、过滤。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

合并滤液于250mL分液漏斗中，加入50mL8%氯化钠溶液，分别用50mL、50mL、25mL、25mL石油醚萃取4次，合并石油醚相，经无水硫酸钠脱水于圆底烧瓶中，用旋转蒸发器(≤40℃)浓缩至约5mL。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱中依次加入3cm无水硫酸钠、8g弗罗里硅土／0．5g活性炭／2g中性氧化铝(土壤用4g)混合吸附剂和3cm无水硫酸钠，用20mL石油醚预淋洗。将样本浓缩液加至柱顶，用石油醚／乙酸乙酯(9∶1，V／V)溶液洗脱。收集前100mL，用旋转蒸发器(≤40℃)浓缩至约3mL，用丙酮定容至10mL，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 3mmi．d．×2m玻璃柱，3%OV-17／Chromosorb WAW DMCS80～100目

检测温度 柱温180℃；进样口270℃；检测器270℃

载气 高纯氮，60mL／min

进样量 1μL

保留时间 1．65min

4．结果计算

外标-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1×10^－10g。

最低检测浓度 花生仁、壳和花生秧0．04mg／kg，土壤0．02mg／kg。

回收率 花生仁、壳、花生秧及土壤中添加乙草胺0．05～1．0mg／kg时，平均回收率为83．0%～94．7%。见表3-2-1。

相对标准偏差 2．2%～5．5%，见表3-2-1。

表3-2-1 花生仁、壳、花生秧和土壤中乙草胺添加回收率及相对标准偏差实验结果