荧光抗体

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又称免疫荧光技术。

把结合有荧光素的抗体溶液浸染标本，使其同标本中的特异抗原结合，从而在显微镜下利用荧光标记显示抗原存在部位的方法。

该技术的主要操作步骤是，首先将一定抗原多次注入到动物体内，使动物血液中产生相应的特异抗体，此即抗血清。从抗血清中提纯出抗体，再用适当的荧光素标记抗体，制成荧光标记抗体溶液。用该溶液浸染含有特异抗原的标本，使荧光抗体同特异抗原结合，形成了抗原－抗体－荧光素复合物。

由于该复合物在荧光显微镜下发射出一定波长的彩色荧光，故可对标本中的抗原进行定位。

荧光抗体技术可分为两种方法，一种为直接法，另一种为间接法。

直接法是用荧光抗体溶液浸染标本，使荧光抗体直接同特异抗原结合，显示出抗原的存在部位。间接法是使用两种抗体，即抗体Ⅰ和抗体Ⅱ。抗体Ⅰ是一定抗原的特异抗体，不标记荧光素。

抗体Ⅱ是针对抗体Ⅰ的特异抗体，标记上荧光素。抗体Ⅰ既是一定抗原的对应抗体，又是抗体Ⅱ的特异抗原。在间接法中，先用抗体Ⅰ溶液浸染标本，形成抗体Ⅰ－抗原结合物，再用荧光素抗体Ⅱ浸染标本，形成抗原－抗体Ⅰ－抗体Ⅱ－荧光素复合物。

两种方法各有优点，直接法操作简单，特异性强，间接法则灵敏度高。

荧光抗体技术具有广泛的用途。

在医学上可用于微生物、病毒、原虫等病原体的鉴定。在基础研究中可用于细胞内酶、激素和细胞内各种蛋白质的定位。该技术在免疫学研究中应用尤为广泛，例如，免疫病、肿瘤免疫和免疫球蛋白代谢等方面的研究均常用荧光抗体技术。