芝麻籽粒、植株和土壤中残留量检测方法(方法一)

---

北京市农林科学院植物保护环境保护研究所 陈家梅 戴荣彩 夏福利 王漫琳

样本中精喹禾灵母体用石油醚提取；代谢物用二氯甲烷提取。液-液分配和中性氧化铝柱层析净化，气相色谱法(ECD)和液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECI))

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

玻璃层析柱 12mm i．d．×280mm

2．主要试剂

丙酮、乙酸乙酯、石油醚、甲醇、乙腈、磷酸、盐酸、乙酸、无水硫酸钠、中性氧化铝、弗罗里硅土

精喹禾灵标准品、精喹禾灵酸(代谢物)标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 精喹禾灵母体的提取

称取10．0g芝麻样本(植株10．0g、土壤20．0g)于250mL具塞三角瓶中，加入100mL丙酮，振荡提取1h，抽滤。用50mL丙酮／石油醚(1∶1，V／V)洗涤滤渣。

3．1．2 代谢物精喹禾灵酸的提取

称取芝麻样本10．0g(土壤20．0g)于250mL具塞三角瓶中，加入80mL甲醇／丙酮(6∶2，V／V)和20mL1．5mol／L盐酸溶液，振荡提取1h，抽滤。用20mL提取剂洗涤滤渣。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

3．2．1．1 精喹禾灵母体

合并滤液，转入500mL分液漏斗中，加入200mL2%硫酸钠溶液，用50mL、40mL、30mL石油醚萃取。合并石油醚相，经无水硫酸钠脱水后用旋转蒸发器(40℃水浴)浓缩至2mL左右，待柱层析净化。

3．2．1．2 代谢物精喹禾灵酸

合并滤液，转入500mL分液漏斗中，加入200mL2%硫酸钠溶液，用50mL、40mL、30mL二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水后用旋转蒸发器(40℃水浴)浓缩至2mL左右，待柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

3．2．2．1 精喹禾灵母体

在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、6g中性氧化铝和2cm无水硫酸钠，用10mL7%乙酸乙酯／石油醚预淋。转入样本浓缩液后用70mL15%乙酸乙酯石油醚溶液洗脱。收集全部洗脱液，浓缩至干。用石油醚定容(芝麻、植株2mL，土壤1mL)，待测。

3．2．2．2 代谢物精喹禾灵酸

在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、3g中性氧化铝和2cm无水硫酸钠，用20mL甲醇预淋。将浓缩液转入柱内，用10mL甲醇分两次洗涤浓缩瓶后转入柱内并淋洗，弃去。用60mL37%乙酸／二氯甲烷／甲醇(1∶50∶50，V／V／V)，洗脱并全部收集。浓缩至干，用乙腈定容至2mL，待测。

3．3 色谱法测定

3．3．1 气相色谱法(精喹禾灵母体的测定)

检测器 ECD

色谱柱 3mmi．d．×2m玻璃柱，4%OV-101／Chromosorb WHP，80～100目

检测温度 柱温270℃，进样口300℃，检测器310℃

载气 高纯氮，2kg／cm²

进样量 2μL

保留时间 4．5min

3．3．2 液相色谱条件(代谢物精喹禾灵酸的测定)

检测器 UV

波长 238 nm

色谱柱 双柱ODS150mm×4．6mm×5μm；ODS250mm×4．6mm×5μm

柱温 室温

进样量 20μL

流动相与梯度洗脱程序如下：