男性生育力的内分泌检查

男性生育力要受到下丘脑-脑垂体-性腺轴调节和控制，因此测定该轴有关激素的含量和动力学变化是判断男性生育力的一个重要方面，目前常用的有以下几种方法。
血浆睾酮水平测定 睾酮是睾丸产生和分泌的主要男性激素，外周血浆含量成年男子(21～45岁)596±202ng/100ml，女子(20～35岁)46±21ng/100ml。测定血浆睾酮，本世纪六十年代主要使用气相层析或同位素稀释法，这两种方法本身灵敏度高，它能自试样中测出小于微克量的睾酮，但方法不具有特异性，要求预做复杂繁琐的纯化工作所以效率低代价高，不能推广普及。七十年代初期使用放射性同位素蛋白竞争法测定血浆睾酮，本法是利用动物血浆中含有小量性激素结合球蛋白(SHBG)来进行的。因为SHBG能表现出与血浆中睾酮有高度亲和力的特性。测定的大致过程是： 被测者血浆先用有机溶媒（例如二氯甲烷等）提取所含的睾酮，并加以简单的纯化处理；另外，准备一定量氚标记睾酮。两者一起置入含有SHBG的缓冲溶液中，让它们与SHBG发生竞争，两种睾酮都按照各自的实际浓度在SHBG上占有与自己浓度相适应的比值，氚标记睾酮结合的多少能通过液体闪烁计数器测定其β射线的强度便可知道。实验结果要与同样数量氚标记睾酮单与SHBG结合后释放的β射线强度作对照比较，前一项测定中β射线强度减少的部分，即是由被测血浆的睾酮所竞争，从而能推算出被测血浆中的睾酮数量。同位素竞争法有毫微克水平的灵敏度，能自半毫升血浆测出血睾酮的正确含量，误差不到10%，从而克服了长期存在的血睾酮测定不能普及的困难，这是测定激素技术上的一个重大突破。
七十年代中期成功地利用睾酮与蛋白质以共价键联接而成的结合体作为免疫抗原，对动物进行免疫，产生高效价的对睾酮有高度特异性的抗血清，它含有抗体球蛋白，这种抗体球蛋白对睾酮表现出比动物血浆中性激素结合球蛋白更大的亲和力，用这种抗体在同位素竞争法中替代SHBG，就可以更进一步提高灵敏度和精确度，这就是“放射免疫测定法”(RIA)。用RIA法测定血睾酮，血浆用量可以减少到0.1ml，误差可以小于10%，一人每天可以处理50个血样，由于RIA较蛋白竞争法具有技术、效率和经济上的优越性，所以正在迅速普及中。血睾酮有昼夜变化，高峰在清晨4～9时，一般取血时间以晨6～8时空腹为宜。
人绒毛膜促性腺激素刺激试验 人绒毛膜促性腺激素(hCG)可以自孕妇尿中提取，经过纯化，制成针剂供临床使用。hCG不是垂体分泌的促性腺激素(GnH)但具有与黄体生成素(LH)相类似的作用，能促进睾丸功能，促使间质细胞发育，分泌睾酮等性激素，能促使男童开始发育，促使女性卵巢分泌性激素及促进排卵。正常男性注射hCG后，血睾酮浓度上升，非原发性睾丸功能低下患者注射hCG能有所恢复。对男性患者进行hCG刺激试验，可以验证是否存在睾丸或有分泌功能的睾丸组织，反应阳性说明能活动的睾丸组织确实存在，但反应阴性尚不能立即作出排除的结论，因为，受试前睾丸组织的活动情况，对试验时的反应有显著影响。正常成年男性，第一次注射后出现高峰的幅度较对比值可能高两倍以上，高峰持续到第七天，升高范围50～200%。高峰时血睾酮浓度也可能不超过正常成年男子的正常值高限。但到达或超过1,000ng/100ml的水平，并不少见。
试验程序有多种方式，长程试验采用hCG注射剂量1,000～5,000IU，两次注射间隔1～4天。试验全部程序1～6周，肌注hCG吸收速度较慢，正常反应也需要24小时后达到高峰。短程试验可以采取如下程序： 第一天先取刺激前对照血样，然后肌注hCG 2,000IU，第四天先取刺激后第一次血样，然后第二次肌注hCG 2,000IU，第七天取刺激后第二次血样，三次血样都作血睾酮测定。未发育或隐睾患者，两次注射hCG尚不足以引起足够的反应，必要时继续每隔3天注射一次hCG2,000IU，直到注射12次(全程共6周)，每次注射前采取血样作血睾酮测定。隐睾者反应都偏低，双侧隐睾比单侧低，睾丸未降下者比降下者低。已降下者在两周五次注射后，血睾酮可能达到正常人范围，未降下的睾丸反应迟缓，有必要延长注射程序到四周以上。已进入青春发育期的隐睾病童，要受到自己垂体促性腺激素的影响，对hCG刺激的反应可能接近正常人的水平。单纯性垂体促性腺功能减退病人，在短程试验中反应微弱，可能完全无反应，需要按未发育病例处理。无睾男性的血睾酮基值低，hCG刺激试验都是阴性。成年原发性睾丸功能低下患者，血促性腺激素基值持续偏高，但在hCG刺激试验中则反应微弱。
GnRH刺激试验 促性腺激素释放激素(GnRH)是有10个氨基酸的小多肽分子，产生于丘脑下部，能促使垂体制造及释放促性腺激素(GnH)。促性腺激素包括黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH),GnRH促进LH的分泌比促进FSH的分泌更为显著。GnRH已能由人工合成。并供应临床使用，肌内、皮下、静脉注射或大剂量鼻腔吸收等途径都有效。常用剂量50～200μg。GnRH刺激试验是以一次剂量注射后，观察垂体分泌GnH功能的变化。血LH、血FSH显著上升为反应阳性的指标，说明垂体功能完好，否则为反应阴性，显示垂体功能低下。GnRH刺激试验的意义不同于克罗米芬的刺激试验，前者是对垂体功能的测验，后者是对丘脑下部功能的测验，虽然两种试验的衡量指标都是通过促性腺激素的分泌来判断的。
试验程序，受试者早晨空腹卧床，试验开始先取第一次血样，15分钟后取第二次血样，随即注入Gn RH100μg，注射后20分钟取第三次血样，60分钟取第四次血样，120分钟后取第五次血样。全部血样分别进行血LH及血FSH测定。正常成年男性，注射GnRH2～3分钟后，LH开始上升，20～30分钟后达到高峰，此后逐渐降落，以第一、第二两次血样的测定结果作为基值，则高峰时LH上升可到达基值的3～6倍，FSH上升较慢，幅度也较小，一般不超过3倍。正常人FSH反应不显著的约占15%。青春发育前的儿童： GnRH试验反应阳性。但LH上升幅度低于正常人。青春期间LH反应逐步增强并向成人水平接近，FSH则变化不大，一般与成人相仿。
单纯垂体促性腺功能低下的患者在GnRH试验中反应低于正常人或无反应，但有一部分患者(约20%)能呈正常反应。这类成年患者，下丘脑GnRH的分泌由于负反馈降低而增强，垂体在内生GnRH持续影响下，为进一步对强刺激发出反应准备了条件，情况与青春期前儿童相类似，FSH反应都可能正常。所以GnRH刺激试验的反应与患者垂体衰退的程度及内生GnRH的影响有关。弱反应或无反应的患者经过一段时间的GnRH注射处理后，可以转为正常的阳性反应。GnRH刺激试验全程时间只有两个小时，一般血睾酮的变化落后于LH。长期非原发性功能低下的睾丸组织，也需要有一定的恢复过程，方能表现出足够的反应能力，所以血睾酮不宜作为本试验的衡量指标。
克罗米芬枸橼酸刺激试验 克罗米芬又称氯菧酚胺，药用形式是它的枸橼酸盐。氯菧酚胺能与下丘脑的雌二醇受体相结合，雌二醇是通过与受体结合而后对下丘脑分泌GnRH产生抑制（负反馈）作用的。雌二醇受到氯菧酚胺的竞争，负反馈作用降低，GnRH分泌增强，在下丘脑-垂体-睾丸轴功能正常的情况下，垂体GnH分泌增强，睾丸分泌睾酮增加，血睾酮浓度上升。所以氯菧酚胺可以用作该轴动态试验的刺激药物，氯菧酚胺在人体内半衰期长，停药后，药效可延续5至7天。
试验程序，全过程需要12天，服药前两天先测定血睾酮和血LH的对照值。第三天起连续服氯菧酚胺10天，每天200mg，一次或分次口服。青少年及儿童按体重计算用药量，每公斤体重3mg，血睾酮及血LH都在用药的最后两天达到高峰。作用药最后两天的血睾酮及血LH浓度测定。另一种程序是每天口服氯菧酚胺100～200mg，连服5～7天。短程试验的升高幅度略低于前一种试验程序的数值。
正常成年男子经克罗米芬刺激试验后，LH及FSH的增长率与对照值相比，LH达72～245%,FSH为45～130%，睾酮是40～220%,FSH增长率不如LH与睾酮明显，因此阳性指标以LH与睾酮的增长率为主。男童未发育时该项试验阴性，16岁起一般呈阳性反应。年龄超过17岁，如果反应不明显时，应进行垂体功能检查。氯芪酚胺刺激试验反应阴性仅显示青春期尚未开始，并不说明其原因，也不预示是否将会开始，年龄越大，则垂体功能低下的可能性也越大。成年男子单纯垂体性幼稚症患者可以通过氯芪酚胺刺激试验阴性进行确诊。原发性睾丸功能低下患者，LH值一般偏高，即使用氯芪酚胺刺激也不再上升。原发性无精子及精子稀少的患者，氯菧酚胺刺激试验都呈阳性。