菌体生长率测定法mycelium growth ratetest利用病菌在含有不同浓度药剂的培养基上生长速度的快慢,来判定药剂毒力大小的杀菌剂生物测定方法。它适用于不产孢子或产生孢子缓慢,而菌丝生长迅速、整齐、平伏于培养基上呈放射状生长的病菌。主要用于杀菌剂的毒力比较。菌的生长速率可用两种方法表示: ❶菌落生长达到某给定大小所需的时间(小时或天); ❷一定时间内菌落直径的大小(毫米)。 测定方法 可分为3步: ❶配制含药系列浓度的培养基。配制前计算好浓度,使药液与定量培养基混合后,达到所需的浓度。将培养基倒入培养皿内与药液混匀,置水平面上冷凝。每一浓度重复4次。 ❷打菌盘。用直径0.8~0.9厘米打孔器在培养好的菌落外缘切下菌盘。 ❸移植菌盘。用消毒接种针或镊子将切好的菌盘反转移植到含药的培基上,置于菌的适宜生长条件下培养一定时间后,测量菌盘扩展的直径,与不混药对照菌盘扩展的直径相比,求出药剂的抑制生长率。 
将各处理(浓度)的抑制生长率换成机率值,浓度换成对数值,用直线回归分析法统计出EC50或EC95值,并比较其毒力大小。 注意事项 应注意以下三点: ❶测定应在无菌条件下进行; ❷对于不溶于水的杀菌剂,应先用有机溶剂溶解后,再用水稀释。有机溶剂用量应小于2%,否则会影响结果; ❸抑制生长率多用菌落直径表示,但有些真菌的菌落表现不同,有空中菌丝生长茂盛,而相对菌落直径不大; 有菌落直径很大,而空中菌丝生长很稀疏,这种情况下,可用菌丝的干重来表示。 |