(2)荔枝和土壤中残留量检测方法(方法一)

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广西壮族自治区农业科学院应用农药研究中心 林明珍 卢植新 黄辉晔

在加热的密闭反应瓶中，样本中代森锰锌母体与氯化亚锡-盐酸溶液反应产生CS2气体，气相色谱法(FPD-S)测定；代森锰锌的降解产物ETU用甲醇提取，液-液分配，柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 火焰光度检测器(FPD-S)

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

组织捣碎机

旋转蒸发器

振荡器

2．主要试剂

丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、石油醚、抗坏血酸、氯化铵、盐酸、氯化钠、氯化亚锡、氟化钾(KF·2H₂O)

二硫化碳(CS2)标准品、乙撑硫脲(ETU)标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 代森锰锌母体

称取50g经捣碎的荔枝果肉、果皮或经粉碎过筛的土壤，置于反应瓶中(土壤样本需加水29mL)，加入0．2g抗坏血酸，3g氯化亚锡和150mL10%盐酸，立即加塞密封，振荡5min，于70℃恒温水浴中反应2h，每隔30min取出振摇1次。把反应瓶移置40℃恒温水浴中，测定反应瓶顶空中二硫化碳含量。

3．1．2 乙撑硫脲(ETU)

称取50g经捣碎的荔枝果肉、果皮或经粉碎过筛的土壤，置于具塞三角瓶中，加入甲醇80mL，浸泡过夜，振荡提取30min，抽滤。用30mL甲醇分多次洗涤三角瓶及滤渣，合并滤液。

3．2 ETU的净化

3．2．1 液-液分配

将上述滤液置于分液漏斗中，用石油醚80mL、60mL、60mL洗涤，弃去石油醚相。甲醇提取液用旋转蒸发器浓缩至10mL，转入分液漏斗，加入20g氟化钾(KF·2H₂O)和0．6g氯化铵，振摇使完全溶解，用100mL×2二氯甲烷／甲醇(9∶1，V／V)萃取。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠干燥，用旋转蒸发器浓缩至约10mL。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱中依次装入2cm无水硫酸钠、7g弗罗里硅土／活性炭(10∶1，W／W)和2cm无水硫酸钠，用25mL二氯甲烷／无水乙醇(95∶5，V／V)预淋。将提取浓缩物转移至层析柱中，用40mL、20mL、20mL二氯甲烷／无水乙醇(95∶5，V／V)洗脱，收集全部洗脱液，浓缩定容，待测。

3．3 色谱法测定

3．3．1 代森锰锌母体的气相色谱法测定

检测器 FPD-S

色谱柱 2m×3mmi．d．玻璃柱，5%SE-30／GCS800 AW DMCS，80～100目

检测温度 柱温65℃；进样口150℃；检测器150℃

载气 高纯氮，25mL／min

燃烧气 氢气15mL／min，空气30mL／min

保留时间 51s(CS2)

3．3．2 乙撑硫脲(ETU)的液相色谱法测定

检测器 UV

波长 254nm

色谱柱 C18，250×0．64mm

流动相 甲醇／水(30∶70，V／V)

流速 0．4mL／min

保留时间 7min30s

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 代森锰锌1．3×10^－10g，ETU2．5×10^－10g。

最低检测浓度 代森锰锌0．025mg／kg，ETU0．02mg／kg。

回收率 荔枝果肉、果皮、土壤中添加代森锰锌0．20～5．00mg／kg时，平均回收率分别为89．2%～95．9%，见表2-20-3；添加ETU0．05～1．00mg／kg时，平均回收率分别为89．1%～95．1%，见表2-20-4。

相对标准偏差 0．8%～4．6%，见表2-20-3、2-20-4。

表2-20-3 荔枝和土壤中代森锰锌添加回收率及相对标准偏差实验结果