甘蓝和土壤中残留量检测方法

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农业部农药检定所 龚勇 秦冬梅 高晓辉

样本用甲醇提取，经石油醚、二氯甲烷液-液分配，中性氧化铝柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

匀浆机

振荡器

旋转蒸发器

玻璃层析柱 Φ12mm×250mm，带聚四氟乙烯旋塞

2．主要试剂

甲醇、丙酮、二氯甲烷、石油醚(60～90℃)、甲苯、无水硫酸钠、氯化钠

0．25mol／L盐酸

中性氧化铝 100～200目，130℃处理4h

虫酰肼标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 甘蓝

称取20g样本，加入100mL甲醇／0．1mol／L盐酸(9∶1，V／V)溶液，高速匀浆1min，过滤。

3．1．2 土壤

50g样本，加140mL甲苯和60mL0．5mol／L盐酸，振荡2h，过滤。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

3．2．1．1 甘蓝

在滤液中加入15mL10%氯化钠溶液，用50mL×2石油醚洗涤，弃去石油醚相。水相中加入130mL10%氯化钠溶液，用50mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，浓缩至干，待柱层析净化。

3．2．1．2 土壤

取滤液100mL(相当于25g样本)，加入50mL10%氯化钠水溶液、10mL1mol／L盐酸和140mL水，用80mL×3二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，浓缩至干，待柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

3．2．2．1 甘蓝

在层析柱中装入10g中性氧化铝和1．5cm无水硫酸钠，用35mL甲苯预淋。用35mL甲苯溶解浓缩残余物并移入柱中，用25mL乙酸乙酯／甲苯(5∶95，V／V)溶液淋洗，弃去。再用90mL乙酸乙酯／甲苯(10∶90，V／V)溶液洗脱并收集。浓缩至干，用甲醇定容至4mL，待测。

3．2．2．2 土壤

在层析柱中装入5g中性氧化铝和1．5cm无水硫酸钠，用20mL甲苯预淋。用10mL甲苯溶解浓缩残余物并移入柱中。用40mL丙酮／甲苯(5∶95，V／V)溶液淋洗，弃去。再用20mL丙酮／甲苯(10∶90，V／V)溶液洗脱并收集。浓缩至干，用甲醇定容，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 245nm

色谱柱 100PR-18，250mm×4．6mm×5μm

柱温 42℃

流动相 甲醇／水(67∶33，V／V)

流速 1mL／min

进样量 20μL

保留时间 13．7min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1×10^－9g。

最低检测浓度 0．01mg／kg。

回收率 甘蓝和土壤中添加虫酰肼0．02～0．50mg／kg时，平均回收率为76．7%～96．0%。见表1-32-1。

相对标准偏差 4．3%～12．4%，见表1-32-1。

表1-32-1 甘蓝和土壤中虫酰肼添加回收率测定结果及相对标准偏差实验结果