胃毒毒力测定evaluation of stomach toxi-city

通过试虫吞食带药食料，由消化道中毒致死，以测定胃毒毒力的杀虫剂生物测定方法。可采用喷雾、喷粉、滴加、浸渍等法将杀虫剂施于一定面积的叶片上，制成夹毒叶片或药液加入糖液中饲喂昆虫，或用注射器将含糖药液注入试虫口腔，但要尽量避免药剂与昆虫体壁接触产生触杀作用。
用药方法 因昆虫种类和使用药剂剂型的不同，试虫可以吞食含有药剂的固体食物或药液，根据试虫取食量的差异可分为无限取食法和定量取食法。
无限取食法 试虫可以无限制地取食含有杀虫剂的饲料，不计算实际吞食药量的用药方法。此法简单，但不能避免其他毒杀作用的干扰。主要有饲料混药喂虫法、培养基混药法和毒饵法等。根据试验目的和试虫对象不同，还可选用种子拌药或浸药和糖浆混药饲虫法等。
饲料混药喂虫法 将定量药剂与饲料混合、饲喂试虫的测定方法。将药粉与谷物混合均匀，或用丙酮药液与食物混匀，待丙酮挥发后，然后接虫并置于适宜的温湿度条件下培养，经过7天或10天后检查死亡情况、观察药效。以药剂相当于食物的比例作为含药浓度来表示。以杂拟谷盗(Tribolium confusum)、米象(Sitophilus oryzae)、锯谷盗(Oryzaephilus surinamensis)和麦蛾(Sitatroga cerealella)等仓库害虫为对象。
培养基混药法 将定量药液与人工培养基混匀，再接虫培养的测定方法。如琼脂混药法，用洋菜（琼脂）2克、白糖6克，加水100毫升煮成琼脂冻液，再将杀虫剂配成所需浓度（配制的浓度应比测定浓度大一倍）。吸取5毫升药液放入培养皿内，再加入5毫升热琼脂冻液（药液浓度稀释一半）混匀并使其冷却凝固后，用吸虫管吸取已麻醉的果蝇50头（用低温或氯仿麻醉），放入垫有吸水纸的培养皿盖内，再将盛有含药琼脂冻的培养皿底反放于皿盖内，置于定温(22～ 24℃ )条件下培养，果蝇苏醒后便飞到冻胶上取食，24小时后观察试虫死亡情况。垫吸水纸的目的可以吸去琼脂上多余水分，避免果蝇淹死，还可防止果蝇从玻皿盖与底间的缝隙逃出。琼脂冻倒置可避免中毒击倒的果蝇粘在冻上促使其死亡，影响测定结果。以果蝇(Drosohila melanogaster Meig)为测定对象。
毒饵法 将定量药剂与饵料混匀，再让试虫取食带毒饵料的测定方法。将定量杀虫剂加入到昆虫的饵料(如麦麸、玉米粉、鲜草等)中让试虫取食一定时间后，移入干净器皿，置正常环境条件下饲养，定时检查药效。以蝼蛄、油葫芦、地老虎和蝗虫等为对象。
定量取食法 使供试昆虫按预定杀虫剂的剂量取食，或能准确地测出试虫取食后所吞食药量的用药方法。主要有叶片夹毒法(sandwich method)、液滴饲喂法(feeding of measured drops)和口腔注射法(mouthinjection)等。目前以叶片夹毒法应用较广，口腔注射法，因注射入口腔比一般注射难度更大，技术难以掌握，所以目前极少采用。
叶片夹毒法 根据试虫吞食的夹毒叶片面积，来计算取食药量的测定方法。适用于取食大的植食性咀嚼式口器昆虫，如粘虫、斜纹夜蛾、玉米螟、家蚕等。此法由坎贝尔(F. L. Campbell)于1929年提出。优点是可减少试虫与杀虫剂接触，避免发生触杀作用，操作方便，结果比较精确，但计算吞食面积费时间。方法是： ❶采用喷粉（或喷雾）法将一定量杀虫剂均匀地施于叶片上，另用一张大小相同未处理的叶片，涂上浆糊，小心地覆盖其上做成夹毒叶片，以不同大小的叶片（不同药量）饲喂已知体重的试虫嚼食，然后将剩余叶片移置于有坐标纸的玻璃片上，在放大镜下观察计算所吞食的叶面积，计算吞食药量（见图）。并给试虫喂以新鲜无毒叶片，置于恒温恢复室

叶片夹毒法试验用具
(据广东农林学院化保组，1976)

内，24小时或48小时后，观察试虫的死活反应，求致死中量。
❷将不同浓度的丙酮药液滴加在小叶片上，待丙酮挥发后，按以上法做成夹毒叶片，饲喂已知体重的试虫，让其全部吞食后，再喂以新鲜无毒叶片，其余同❶法。

液滴饲喂法 根据试虫吞食带药糖液的数量，来计算吞食药量的测定方法。家蝇、果蝇、蜜蜂等舐食性昆虫喜欢吃糖液，可将定量杀虫剂加入到糖浆或糖汁内，用微量注射器形成一定大小的液滴(0.01～0.001毫升)，直接饲喂试虫。或在试验前后称量试虫，测定其吞食量，即将形成的液滴放在玻璃片上，让试虫自行舐食、舐食前后都称重，以决定其吞食量。试虫经药剂处理后，放入清洁干燥器皿中，置恒定的温湿度条件下，定期观察中毒死亡情况，求出致死中量。此法只适于舐食性昆虫，不适用于植食性昆虫，不能排除触杀作用的干扰，测定结果偏高，在实践中很少应用。
毒力计算 毒力大小以致死中量表示，其计算方法可根据每个剂量（或浓度）处理试虫的多少而异，主要有两种： ❶如用5～ 6个系列剂量（或浓度）分别处理 一定数量的试虫(30头左右)，可得出各剂量（或浓度）的相应死亡率，由剂量对数死亡机率值直线求出致死中量；
❷不同的剂量分别处理一定数量试虫、整个试验所用试虫约60～ 80头，须逐个称重单独饲养，求出每头试虫的取食药量，换算出每克昆虫体重的吞食药量，24小时或48小时后观察记录试虫的死活情况。致死中量的计算是根据每克虫体重吞食药量多少与试虫死活情况，顺序排列，可分成死亡组、中间组、生存组。死亡组与生存组的试虫全死或全活，均不参与计算，只从中间组中分别算出生存的个体及死亡的个体各自平均吞食药量，以A及B表示，两者平均数即为致死中量(微克/克)。

式中 A为生存个体的平均每克虫体重吞食药量(微克/克);B为死亡个体的平均每克虫体重吞食药量(微克/克)。