是利用离子交换树脂(固定相)与溶液(流动相)中的离子之间所发生的交换反应进行分离的方法。通常在柱内进行。样品带电的分子在固定相上连续进行可逆的吸附交换和解吸作用,由于各种物质对交换剂的亲和力不同,移动速度有快有慢,从而达到分离的目的。
离子交换色谱法
离子交换色谱法是分离离子性组分的一种色谱法。以含有酸(如—SO3H)或碱(如—NH3OH)基团的树脂或其他高分子物质(统称离子交换剂)为固定相,填充于柱内。操作同一般色谱法。离子样品组分在柱内移动时,即与固定相上之酸碱基团中的游离离子相交换,如:
树脂—SO-3H++B+⇌树脂—SO-3B++H+
树脂—NH+3OH-+A-⇌树脂—NH+3A-+OH-
由于各离子组分的交换速度不同而得分离。离子交换剂根据所含基团之不同分为阳离子交换剂(含酸性基团)及阴离子交换剂(含碱性基团)。根据基团的酸性与碱性的强弱又有强酸、弱酸与强碱、弱碱交换剂之分。
离子交换色谱法在氨基酸、有机酸、生物碱等可形成离子化合物的分离中应用较广,现已有自动化的氨基酸离子交换分析仪,使用时同一般柱色谱法,洗脱液通常为不同pH的盐溶液。