白细胞粘附抑制试验

白细胞粘附抑制试验(LAI)是一种特异性细胞免疫的测定方法。其原理是人类外周血中的中性粒细胞和单核细胞，在一定条件下能粘附在清洁的玻璃表面。但当将被一定抗原致敏的个体白细胞加到含有相应抗原的培养液中温育时，已被致敏的淋巴细胞在相应抗原的刺激下，可释放出粘附抑制因子，抑制中性粒细胞和单核细胞的粘附能力，呈现白细胞免疫粘附抑制现象。一般说，不同的抗原之间不发生交叉反应。故粘附抑制试验阳性可提示检测的淋巴细胞已被所测试的抗原致敏。如肿瘤患者自身血清可以阻断白细胞粘附抑制现象，说明血清中存在着封闭因子，因此本试验还可用作封闭因子测定。LAI有直接法（一步法）和间接法（二步法）两种：前者直接将抗原与被检白细胞放在一起培养，观察粘附抑制情况；后者先将抗原与被检白细胞一起温育，然后离心取出上清液，将之加入正常人白细胞悬液中，观察其对正常人白细胞粘附的影响。如被检淋巴细胞已致敏，则上清液中可含有它释放的粘附抑制因子，正常人白细胞粘附可被抑制，通常多应用直接法。
白细胞粘附抑制试验方法很多，有测定粘附细胞的血细胞计数板法和微量塑料板法，以及测定未粘附细胞的试管法、毛细管法和放射性核素法，目前较多使用的是血细胞计数板法和试管法。白细胞计数板法是直接将被检的白细胞悬液与特异抗原混合，在37℃温育1/2h，然后滴加于计数板中，再在37℃中静置1h，计数有核细胞数。然后将计数板在缓冲液中浸洗2～3次，漂洗去未粘附的细胞，重新计数，即为粘附细胞数。对照板不加抗原或加非特异性抗原，同样操作。按下列公式算出粘附百分率和粘附抑制百分率。

一般正常粘附细胞百分率可达80%以上，如不加抗原的对照板<40%，则无比较意义。粘附抑制百分率>10%即表示白细胞粘附抑制反应阳性。试管法是直接将被检查的白细胞悬液与特异抗原一起加到玻璃试管内，温育前作细胞计数。水平位温育1h后，轻轻直立试管，吸出计数未粘附细胞，测算出未粘附细胞百分率。与不加抗原或加非特异抗原对照管中的未粘附细胞百分率比较，测出未粘附细胞指数(NAI):NAI>30以上有意义。

封闭因子测定是取病人白细胞，加上自身血浆及相应抗原，相互作用后，按上述方法测定以正常人血清作对照，观察其自身血浆是否有阻断粘附抑制现象。
此试验主要用于肿瘤的早期诊断、疗效判定和预后估计，方法较简便，快速敏感，并有抗原特异性，重复性较好。