植物病毒分离isolation of plant virus

从自然感染病毒的植株中，去除其他病毒种类或株系而获得所需的单一病毒种类或株系的过程。亦称生物纯化(biological purification)。分离是鉴定植物病毒、了解与研究植物病毒病害发生发展规律及其控制的基础工作。
早在20世纪初，美国奥顿(W.A.Orton,1914)和加拿大范德波尔(T.C.Vantelpool,1925～1930)分别报道了马铃薯X病毒与Y病毒对马铃薯以及烟草花叶病毒与马铃薯X病毒对番茄同一植株的混合侵染现象。30年代又报道了植物病毒不同株系的存在与混合侵染问题。此后即开展了植物病毒各种分离方法的研究。常用的分离方法如下。
利用寄主植物分离病毒 用只能感染某种病毒的专化寄主植物从混合感染的病株中进行分离。例如曼陀罗可以感染马铃薯X病毒，但对马铃薯Y病毒是免疫的。因此，接种曼陀罗可将马铃薯X病毒从混合感染的病株中分离出来。对同一种病毒不同株系的分离，亦可采用一套鉴别寄主来加以区别。例如为害番茄的烟草花叶病毒的株系就是利用一套具有不同Tm抗病基因的GCR系统番茄品系来区分的。产生局部病斑的寄主植物，不但能够分离混合侵染的病毒，而且还有进一步生物纯化的作用。例如烟草混合感染烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒，可以分别在心叶烟和苋色藜上引起局部枯斑而得到分离。经过连续几次在枯斑寄主上的分离与转接，最终就能获得生物纯化的病毒。
利用不同传播途径分离病毒 各种病毒有不同的传播方式，可用以分离混合侵染的病毒。例如马铃薯X病毒可经汁液摩擦传播，而马铃薯Y病毒只能通过桃蚜传播，因而可以采用不同传播方法将两者分开。又如烟草环斑病毒是种子传毒，可利用带毒种子将不能种传的黄瓜花叶病毒分离。另外，对两种靠不同介体或传毒方式传播的病毒，如甜菜黄化病毒由蚜虫传播，甜菜坏死性黄脉病毒则由多粘菌传播，桃蚜以持久传病方式传播马铃薯卷叶病毒，而以非持久方式传播马铃薯Y病毒，则可用这种不同种类的介体或传毒方式的差异来进行分离。同样利用不同介体种类也可分离病毒的不同株系。例如大麦黄矮病毒就是根据不同蚜虫传毒的专化性来区分株系的。
利用病毒的钝化指标分离病毒 病毒的钝化指标包括致死温度、稀释限点及体外保毒期。利用不同病毒钝化指标上的差异来达到分离的目的。例如烟草花叶病毒的致死温度在90℃以上，而黄瓜花叶病毒则为60～70℃，如果对混合感染的病株汁液在接种前加以高温处理(90℃,10分钟)，即可排除黄瓜花叶病毒。
其他方法 对少数用以上方法不能分离的病毒，还可采用电泳和色层分析等方法进行分离。