T淋巴细胞亚群测定
人类T淋巴细胞,根据其表面受体及功能的不同,可分为若干亚群: 表面有IgG重链γ的受体者称Tγ细胞,有人认为可能就是抑制性T细胞(Ts); 表面有IgM重链μ的受体者称Tμ细胞,可能是辅助性T细胞(TH);带IgA重链α的受体、IgE重链ε的受体和IgD重链δ受体者,分别称为Tα、T
和Tδ细胞。 临床上受重视的是Tγ和Tμ细胞。将用密度梯度法分离出的淋巴细胞与绵羊红细胞作用,则绵羊红细胞与T淋巴细胞表面受体结合,形成E花环,然后再用密度梯度法将形成E花环的T淋巴细胞和未形成花环的单个B、K细胞分开。再加入0.83%氯化铵-Tris缓冲液,使T淋巴细胞周围的绵羊红细胞破坏,洗涤后,即得纯化T淋巴细胞。以牛或鸡红细胞免疫兔,制备兔抗牛或鸡红细胞血清,经硫酸铵盐析及DEAE纤维素柱层析,可得纯化的抗IgG型抗体;直接过Sephadex G-200层析柱,可得纯化IgM型抗体。使牛或鸡红细胞与亚凝集价、纯化的IgG或IgM作用,即得牛或鸡红细胞与其抗体IgG或IgM结合的复合物EAG或EAM。将纯化T细胞和EAG或EAM复合物混合培育后,即可制片、染色。计数EAG或EAM花环细胞等。凡能吸附三个以上EAG或EAM复合物者为一个Tγ细胞或Tμ细胞。正常值末梢血液中Tγ细胞为10.6±5%,Tμ细胞为39.5±13.9%。
正常机体中T淋巴细胞各亚群尤其是Tγ与Tμ之间,存在着互相联系、互相制约的关系。Tγ细胞数量减少或功能降低易发生体液免疫功能增强,可见于I型变态反应及自身免疫性疾病等; 而Tγ细胞过度增生或活性过强,可发生细胞免疫功能低下的疾病、免疫缺陷及肿瘤等。因而T淋巴细胞亚群的测定,对I型变态反应、自身免疫病、肿瘤及免疫缺陷等疾患的诊断、发病机理、评定疗效和判断预后等均有帮助。在脏器移植、妊娠反应、衰老机理的研究中,也有一定意义。Tγ及Tμ细胞是在体液及细胞免疫中均起调节作用的细胞,寻找选择性地激活或抑制这两类T细胞亚群的药物和方法,将对调节免疫产生积极作用。