甜菊糖苷

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一、甜菊糖苷的鉴别

1．试剂和溶液

1．1 无水乙醇。

1．2 硅胶G 薄层分析用。

1．3 过碘酸钠溶液 4%水溶液。

1．4 显色剂 1%对硝基苯胺乙醇液+盐酸(4+1)。

2．操作步骤

取本品约5mg置试管中，加无水乙醇1mL使溶解，制成供试液。另取甜菊苷对照品，加无水乙醇制成每毫升含5mg的溶液。照薄层层析法试验。吸取上述两种溶液各30μL，分别点于硅胶G板上，用氯仿∶甲醇∶水(35∶20∶4)为展开剂，展开后，喷以4%过碘酸钠水溶液，10min后，再喷以1%对硝基苯胺乙醇盐酸(4∶1)液，供试液所显黄色斑点的位置与对照斑点相同。

二、甜菊糖苷的含量测定

(一)滴定法

1．试剂和溶液

1．1 0．05mol／L氢氧化钾－乙醇标准溶液 取氢氧化钾3．5g，置锥形瓶中，加无醛乙醇适量使溶解并稀释成1000mL，用橡皮塞密塞，静置24h后，迅速倾取上清液，置具橡皮塞的棕色玻瓶中。

精密量取盐酸滴定液(0．05mol／L)25mL，加水50mL稀释后，加酚酞指示液数滴，进行滴定。根据滴定液的消耗量，算出样品液的浓度，即得。临用前应标定浓度。置橡皮塞的棕色玻璃瓶中，密塞保存。

1．2 0．05mol／LHCl标准溶液 量取4．5mL盐酸，加适量水稀释至1000mL。

1．3 酚酞溶液 1%乙醇溶液。

1．4 5%硫酸溶液 5mL浓硫酸加入95mL水中。

2．测定方法

称取样品0．3000g，置于三角烧瓶中，加入5%硫酸50mL在电炉上加热水解0．5h，冷却，用单层慢速定性滤纸过滤，用蒸馏水洗涤沉淀至pH7，再用95%乙醇50mL溶液沉淀；然后以酚酞指示剂，用0．05mol／L氢氧化钾－乙醇标准溶液滴定至粉红色，同时做一空白试验。

3．分析结果的表述

式中 c——氢氧化钾乙醇溶液的浓度，mol／L

V——氢氧化钾乙醇溶液消耗的毫升数，mL

V₁——空白试验氢氧化钾乙醇溶液消耗的毫升数，mL

E——甜菊糖苷相对分子质量(804．86)

m——样品的质量，g

(二)比色法

1．原理

根据甜菊糖苷与蒽酮反应，在620nm有最大吸收。其含量与吸光度成正比，符合朗伯比尔定律。

2．试剂和溶液

2．1 无水乙醇。

2．2 0．3%蒽酮硫酸液(90%体积分数)。

2．3 甜菊糖苷标准溶液 精密称取甜菊糖苷标准品20mg，置10mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。吸取此液1．0mL置50mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

3．测定方法

3．1 标准曲线的绘制 精密量取标准液0．25mL，0．50mL，0．75mL，1．00mL，1．25mL与1．50mL分别置于试管中，加无水乙醇稀释至2mL，沿壁加0．3%蒽酮硫酸(90%V／V)溶液，置80℃水浴中，加热20min取出，立即放入冰浴中，在620nm波长处测定其吸光度，绘制标准曲线，如图11－3所示，从中看出浓度范围在每毫升含0．01～0．1mg甜菊糖苷时符合比尔定律。

3．2 样品测定 精密称取供试品适量(相当于甜菊糖苷20mg)，置于10mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。精密量取1．0mL置50mL量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。吸取2mL，按标准曲线绘制项下方法操作，测定吸收度，并根据标准曲线换算成甜菊糖苷的百分含量。

4．分析结果的表述

式中 m₁——由标准曲线得到样品液中甜菊糖苷的含量，mg

m——样品质量，g