果糖的测定

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在酸性条件下钼酸铵与果糖能生成蓝色化合物，在一定条件下蓝色深浅与含糖量成正比。本法对果糖测定灵敏快速，但对蔗糖也有显色反应，只是呈色较浅，光密度值较低。对葡萄糖在相同浓度范围内，几乎没有显色反应。

试剂

(1)钼酸铵显色剂：

甲液：5N硫酸、140毫升浓硫酸加入到860毫升蒸馏水中。

乙液：16%钼酸铵溶液、称80克钼酸铵，溶解在水中，定容至500毫升。

使用前，将甲乙两液等体积混合。

(2)果糖标准溶液：称干燥果糖(真空干燥55℃24小时)100毫克，溶于100毫升水中，为1毫克／毫升果糖溶液。然后再稀释10倍成100微克／毫升标准果糖溶液。

操作步骤

1．标准曲线的制作：取7支试管依次加入果糖标准液0，0．1，0．2，0．4，0．6，0．8，1．0毫升，用蒸馏水补足到2毫升，各管含果糖量分别为0，10，20，40，60，80，100微克。然后加入4毫升显色剂，摇匀后放80℃水浴保温30分钟，冷却。于650毫微米处分别测定光密度值。以果糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，绘制标准曲线。

2．样品测定：称取烘干样品400毫克，放入研钵中，加水10毫升，研磨均匀，全部转移至离心管中，3000转／分离心5分钟，将上清液倒入100毫升容量瓶中。再用10毫升蒸馏水洗离心管中的沉淀物，搅拌离心后将上清液合入第一次离心的容量瓶中，最后定容至100毫升。此为待测样品液。

取2毫升待测样品液，糖浓度约为20～40微克／毫升，加入试剂量和操作方法同标准曲线制作。测得的样品光密度值在标准曲线上查出果糖含量。

3．计算：