(3)糙米、稻壳、植株、土壤和田水中残留量检测方法

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中国农业科学院烟草研究所 李义强 曹爱华 徐光军 刘保安 孙惠青 郑晓

样本用丙酮／水提取后，二氯甲烷液-液分配，弗罗里硅土柱层析净化，气相色谱法(NPD)测定。

1．主要仪器及设备

气相色谱仪 氮磷检测器(NPD)

小型粉碎机

高速剪切乳化机

超声波提取器

旋转蒸发器

层析柱 Φ15mm×30cm

2．主要试剂

丙酮(重蒸)、二氯甲烷(重蒸)、三氯甲烷(重蒸)、无水硫酸钠

饱和氯化钠溶液、活性炭

弗罗里硅土80～100目，600℃处理4h，加5%水减活

三唑酮标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 田水

样本解冻后，用布氏漏斗抽滤。

3．1．2 土壤

称取50g样本，加入80mL丙酮和20mL蒸馏水，振荡提取1h，抽滤。用50mL丙酮冲洗残渣。合并滤液。

3．1．3 植株(秧)、壳

称取干样10g，加入80mL丙酮和20mL水(鲜样20g加100mL丙酮、25mL水)，浸泡过夜。振荡提取1h，抽滤。用50mL丙酮冲洗残渣，合并滤液。

3．1．4 糙米

称取20g样本，加入50mL蒸馏水，浸泡1h。加入100mL丙酮，振荡提取1h，抽滤。用50mL丙酮冲洗残渣，合并滤液。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将滤液转移到500mL分液漏斗中，加入20mL饱和氯化钠溶液和140mL蒸馏水，分别用50mL、50mL、30mL二氯甲烷萃取。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠干燥后，减压浓缩至近干，糙米、土壤、田水浓缩液用丙酮定容为5mL，待测。植株及稻壳浓缩液需柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

将植株及稻壳浓缩残渣转移到装有10g弗罗里硅土和2g活性炭的层析柱中，用80mL三氯甲烷／丙酮(9∶1，V／V)洗脱，收集洗脱液，用旋转蒸发器减压浓缩至近干，丙酮定容至5mL，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 NPD

色谱柱 DB-5，30m×0．32mm×0．25μm

检测温度 进样口235℃；检测器250℃；柱温180℃，3min，20℃／min，230℃，15min

载气 高纯氮，20mL／min

燃烧气 空气60mL／min；氢气2mL／min

保留时间 三唑酮为10．3min，三唑醇为11．2min

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 三唑酮、三唑醇均为1×10^－11g。

最低检测浓度 糙米、稻壳、稻秧0．01mg／kg，田水、土壤0．001mg／kg。

回收率糙米、稻壳、稻秧和土壤中添加三唑酮0．05～1．00mg／kg时，平均回收率为84．4%～89．4%；各样本中添加三唑醇0．05～1．00mg／kg时，平均回收率为79．8%～90．6%。见表2-32-3。

相对标准偏差 1．2%～8．8%，见表2-32-3。

表2-32-3 糙米、稻壳、稻秧和土壤中三唑酮与三唑醇添加回收率及相对标准偏差实验结果