烟叶和土壤中残留量检测方法(方法一)

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云南省农业科学院植物保护研究所 张雪燕

抑芽丹在盐酸作用下由糖甙形式被水解为游离态，SPE-C₁₈柱净化，液相色谱法UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

超声波振荡器

植物样本粉碎机

全玻回流装置

2．主要试剂

甲醇(色谱纯)、磷酸、盐酸、双蒸水

1mg／mL标准储备液在100mL容量瓶中，称取抑芽丹标准品(99．7%)0．1000g，用双蒸水定容后，在超声波振荡器中震荡使其溶解。

标准溶液的配制 准确吸取0．5～8mL标准储备液，加入4mol／L盐酸溶液定容至100．0mL(1周内使用)。

SPE-C₁₈柱 500mg／10mL

抑芽丹标准品

3．检测步骤

3．1 提取

称取干烟叶5．0g，鲜烟叶10．0g，土壤50．0g，分别装入500mL蒸馏瓶中，准确加入100．0mL4mol／L盐酸溶液，在沸水中回流1h。冷却至室温，用双层滤纸漏斗过滤。

3．2 净化

将SPE-C₁₈柱依次用10mL甲醇、5mL双蒸水活化。取8mL左右上述滤液转入柱中自然下淋。弃去前4mL淋出液，收集后4mL洗脱液，待测。样本提取净化液在冰箱中储存，1个星期内稳定。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 220nm

色谱柱 4．6mm×250mm，C₁₈柱

流动相 0．3%磷酸(每次检测完毕，需用甲醇冲洗色谱柱至平衡)

流速 0．8mL／min

进样体积 10L

保留时间 10．1min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

测定时所用标准溶液与待测样本中抑芽丹的浓度应尽量接近。

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 5×10^－9g。

最低检测浓度 干烟叶10mg／kg，鲜烟叶5．0mg／kg，土壤1．0mg／kg。

回收率 鲜烟叶和干烟叶中添加抑芽丹20．4～203．6mg／kg时，平均回收率分别为98．0%～100．0%和95．3%～103．4%；土壤中添加抑芽丹4．07～40．7mg／kg时，平均回收率为78．8%～98．5%。见表3-23-1。

相对标准偏差 1．6%～10．9%，见表3-23-1．

表3-23-1 烟草和土壤中抑芽丹添加回收率及相对标准偏差实验结果