转染与转化

转染是对真核细胞而言，外来的DNA参入到真核细胞使之获得了新的遗传物质（基因）的过程称为转染。转化是对原核细胞而言，是指外来DNA参入到原核细胞使之获得了新的遗传物质（基因）的过程。而对真核细胞而言，转化则是指在细胞培养中由正常细胞转变为癌细胞的过程。
真核基因转化到原核细胞常常由于细菌中缺乏转录后或翻译后的加工体系（如蛋白的糖基化等），真核基因不表达或表达不完全。所以现在研究真核基因的表达就采取转染的方法。以对真核细胞有感染能力的病毒基因(例如SV40 DNA)作为载体，与真核基因重组后，将真核细胞经适当处理（磷酸钙）或直接法进入细胞核内，将外源基因DNA参入到真核细胞，使之产生外源真核基因的表达产物。例如用HeLa细胞转染β珠蛋白与SV40的重组DNA后，就可以在HeLa细胞内表达β珠蛋白(图1)。

图1 外源基因转染真核细胞

在重组DNA技术中，把外来基因，例如人的珠蛋白基因重组到质粒上(例如PBR322质粒)，然后将这个重组体转入细菌细胞中，这个带外源基因的细菌含有了新的遗传物质。能接受外来DNA的细胞称为相容细胞，制备相容细胞细菌株，称为受体菌株。最简单的方法是将受体菌用50mmol/L CaCl2处理就成了相容细胞。外来DNA的重组质粒与相容细胞接触后，有少部分进入细胞内，这些细胞出现了新的遗传特点，例如质粒上抗生素抗性。利用这种抗性的产生就可以将转化了的菌株筛选出来(图2)。

图2 外源基因转化进入细菌
Ap:氨苄青霉素；s:敏感；r:抗性。

人肿瘤DNA（由瘤组织或瘤株细胞中提取），在磷酸钙的存在下进入小鼠的成纤维细胞(3T3细胞)，在适当的培养条件下少部分3T3细胞摄取了肿瘤DNA形成转化细胞株，再培养纯化形成第二代、第三代转化细胞。小鼠3T3细胞能成为转化细胞是由于人瘤DNA整合到小鼠3T3细胞的染色体内并随小鼠染色体而表达所致，这种转化细胞的形成是由肿瘤DNA引起的，由正常细胞转化为癌细胞(图3)。

图3 小鼠3T3细胞的转化