血细胞非特异性酯酶染色
非特异性酯酶是一种作用于短链脂肪酸的酶,如丁酸甲酯、乙酸萘酯等。显示酯酶活性的方法有: 金属盐法、吲哚酚法和同时偶联偶氮染料法三种。常用的是同时偶联偶氮染料法。它是根据细胞中的非特异性酯酶活性,将作用底物乙酸萘酯水解,产生萘酚,并进而与重氮盐偶联,生成不溶性的有色产物。用于显示酯酶活性的作用底物有α-乙酸萘酯、萘酚-AS乙酸酯、萘酚AS-D氯乙酸酯等,以α-乙酸萘酯较为常用。酯酶的活性可出现于成熟单核细胞,幼稚单核细胞较弱; 巨核细胞、血小板呈强阳性; 粒细胞系统细胞多呈阴性反应; 淋巴细胞及红细胞系统一般呈阴性。若将温育液pH值改为酸性并延长温育时间,则α-乙酸萘酯酶的活性主要见于T淋巴细胞,可用此法染色进行淋巴细胞分类。若以萘酚-AS乙酸酯为作用底物,粒细胞阳性程度多数在±~+,单核细胞为++~+++,但可被氟化钠所抑制。用萘酚AS-D氯乙酸酯作用底物时,阳性产物存在于粒细胞中,阳性程度在+~+++,单核细胞为-~±。这种差异的产生,是由于所使用的底物和方法不同,血细胞中存在着数种不同的酯酶,对各种作用底物都有其各自的特异性。观察各系统血细胞中非特异性酯酶活性,有助于区分各种血细胞。在临床上主要用于帮助鉴别淋巴细胞性白血病、粒细胞性白血病和单核细胞性白血病。如结合过氧化物酶、糖原、碱性磷酸酶等染色来考虑,则更有助于上述三种白血病的鉴别。