血清碱性磷酸酶及碱性磷酸酶同工酶测定

碱性磷酸酶(ALP) 为一组在碱性环境中能水解磷酸酯的酶类。正常人血清中的ALP来自肝、骨、胎盘、肾和小肠等组织。由于测定ALP的方法不同，酶活性单位的定义和正常值也不同。Bodansky法是每100ml血清在pH8.6、37℃与β-甘油磷酸钠作用60min，释放1mg无机磷为1 Bodansky u，正常值为1.5～4.0Bo-dansky u/dl; King-Armstrong法是每100ml血清在pH10.0、37℃与对磷酸苯二酚作用15min，游离出1mg酚为1 King-Armstrong u，正常成人为3～13u/dl，儿童可达20～30u; 氨基安替比林法所用底物与King-Armstrong法相同，不是用酚试剂测定游离酚，而是先与氨基安替比林作用后，再与铁氰化钾反应生成红色醌衍生物，其单位定义与King-Armstrong法相同。
血清ALP早在1929年就已用于临床诊断，但其同工酶的分离测定，直到50年代才开始。常用的有以乙酸纤维素膜、琼脂、淀粉和聚丙烯酰胺凝胶等作支持物的电泳法。由于支持物不同，ALP同工酶的图象也不一样。乙酸纤维素膜与琼脂凝胶电泳时可分为六个区带，即ALP_1～6；而淀粉胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳则可分出七个区带，即ALP_Ⅰ～Ⅶ。
由于正常人血清中的ALP大部分从肝脏及骨胳的成骨细胞产生，故在骨胳疾病，特别是骨质生成亢进时，ALP升高较明显，常见于成骨肉瘤、骨转移瘤、骨折愈合期和佝偻病等。肝内外胆道阻塞时，ALP(尤其是肝原性ALP)不能经由胆道排出而逆流入血，以致血清ALP升高。肝细胞内合成亢进也是ALP升高原因之一，见于肿瘤、甲状旁腺和甲状腺功能亢进症等。生理性ALP升高见于儿童发育生长期和妊娠期等。ALP₁带的出现，主要见于肝外胆道阻塞性疾病，并多同时有ALP₂增高。ALP₁增高的原因，可能是胆管内压升高，使肝细胞绒毛中ALP₁生成亢进，且由于胆汁排泄障碍，ALP₁逆流入血所致，故在一定程度上可反映胆汁排泄功能。在淀粉凝胶平板或聚丙烯酰胺圆盘电泳中出现ALP₁带可能与肝细胞癌有关，可作为诊断肝细胞癌的参考。ALP₂带见于正常人血清，若ALP₂增高而ALP₁不显著或甚弱者，常见于肝内胆道阻塞和急性肝炎等。ALP₃带在婴儿血清中明显，在正常成人只偶见微弱痕迹；病理性增高见于骨肉瘤、癌肿骨转移、佝偻病、畸形性骨炎和骨软化症等。ALP₄能耐热，65℃30min仍不失活，妊娠后期血清ALP₄值升高，产后迅速下降，故认为它来自胎盘；有时也见于癌症患者的血清或体腔液标本中。在某些癌组织中ALP同工酶结构与ALP₄有相似处，如“Regan”与“Nagao”ALP同工酶。ALP₅带在正常血清中不常见，但在O型及B型的分泌型个体中出现率较高，尤其在高脂饮食后更为明显，可能是小肠上皮细胞合成的ALP，在血清中属于β脂蛋白组分。肝炎恢复期可见到ALP₅出现，可能是由于胆汁排泄增加，提高了小肠的ALP活性之故。ALP₆一般认为是ALP和免疫球蛋白形成的复合物，可见于一些免疫性疾病。血清ALP活性降低，见于重症慢性肾炎、乳糜泻、贫血及恶病质等。