胚培养embryo culture

对种胚进行人工离体培养的技术。一般用种子繁殖的植物， 种胚发育良好。长期无性繁殖的植物，尤其是一些早熟种的胚，在母体组织内不能正常发育， 或胚生理成熟速度慢于果实成熟速度。此外在柑橘的有性胚及植物远缘杂交时， 也会发生胚在母体内死亡的现象， 对这些植物就可利用胚培养技术获得不育胚的植株。
植物的胚培养是组织培养的一个方面。早在20世纪初有人用它作为育种的一种手段。最早报道的有海宁(E. Hannig,1904)用十字花科的莱菔属(Raphanuscochlearia)和西洋山嵛菜属植物为材料试验胚培养获得成功， 其后， 图基(^Tukey, 1933～1934)又用李属种子进行胚培养。李继侗(1934)在中国最早开展这项研究工作。他发现银杏胚乳的提取物能促进银杏离体胚的生长。从40年代起， 胚培养技术已广泛应用于果树育种并取得进展。
至今， 用于胚培养基的配方种类虽然很多， 但主要有水、无机盐类， 有机物质和凝固物体这4类物质组成。无机盐类主要有氮、磷、钾、钙、镁、硫、铁以及必要的微量元素。有机物质通常是蔗糖； 凝固物为优质琼脂。若培养的胚极为幼小，胚长度/种子长度(PFI)值在0.4以下， 还需要添加某些氨基酸和激动素， 蔗糖浓度也要适当提高。落叶果树的种胚， 接种后需低温处理，否则发芽后枝叶形成莲座状不能成苗。桃胚接种后在2～4℃条件下需经60～80天冷藏。如种胚发育时间短， 则需要低温时间相对延长， 通过休眠长成的试管苗， 在15～25℃条件培育， 待长至4～6片真叶时， 并有发达根系时即可移出。试管苗移栽入土时的栽培技术， 常常是胚培养成败的关键， 为使移植成功，必须加强光照， 培养壮苗， 且每天保持8～10℃温差， 并保持适当温度。约经10天左右，待新叶长出，表明幼苗根系开始恢复生长。柑橘为多胚性植物， 一粒种子含有多个胚， 但其中只有一个有性胚， 其余均为无性胚。有性胚发育弱， 在完熟期大多败育。无性胚严重地干扰了柑橘的杂交育种工作。胚培技术有助于克服这一困难， 进行种胚分离培养， 可提高有性胚的出苗率。不少果树种子出苗极为困难， 须经长时间层积或其它处理。应用胚培养技术， 经过种胚苗的增殖培养、生根培养等步骤， 可以获得苹果、山楂、猕猴桃等落叶果树大量种胚苗植株， 提供了砧木苗的新途径。

---

胚培养embryo culture

分离出的植物胚在培养基上的离体生长。可以分为成熟胚培养和幼胚培养两类。
植物胚培养可以作为一种育种手段。在农、林业上加以应用，其实用意义主要有以下几方面： ❶克服远缘杂交中的杂种不育。通过胚培养对获得杂种有重要的作用。如将大白菜和甘蓝杂交得到的幼胚进行培养，在获得杂交植物后，再行染色体加倍，从而得到四倍体的杂交种子，育成了许多能供生产上应用的“白蓝”品系。陆地棉和亚洲棉杂交胚离体培养，产生了幼苗，为培育早熟、丰产、优质、抗逆的新品种提供了基础。中国对萝卜和大白菜或甘蓝远缘杂交幼胚培养，已获得了正常植株。橙和枳杂种离体胚的培养，使杂交合子排除了珠心胚的干扰而分化成了幼苗。
❷缩短育种周期。离体胚进行培养，可以不经过休眠而萌动，克服休眠种子在发育上的障碍，促进胚的生长和缩短育种周期。如鸢尾属植物的胚，经培育后使能开花期由原来需要两三年缩短到一年以内。栽培的蔷薇品种由胚培养生长的幼苗，在两、三个月内即可开花，种子休眠期长的山楂和桃树的早熟品种用胚培养也取得了成功。
❸克服种子的自然不育性。长期用营养繁殖的植物，常常形成无生活能力的种子，胚培养有可能促使种子萌发。
❹测定种子生活力。休眠种子的生活力测定需要较长时间，如应用胚培养，对快速测定有效。
❺应用于理论研究，如胚发生所需条件、胚乳对胚的作用、胚胎组织对生长物质的反应等，可以借助胚胎培养方法去研究解决。

萝卜属离体胚在不同培养基上培养后的形态

(a)在含有蔗糖和KNO₃的培养基中；(b)在葡萄糖—天冬酰氨培养基中；(c)在10%蛋白胨，1%蔗糖的培养基中； (d)5%蔗糖，0.5%蛋白胨培养基中； (e)5%蔗糖—KNO₃培养基中，示萌发； (f)同(e); (g)由5.3%蔗糖转移到1.25%葡萄糖中；(h)、(i)、(j)萝卜属的胚。

培养基是胚培养的重要因素。成熟胚在较为简单的、只含有大量元素的无机盐和糖的培养基上就可以生长，因为这时期胚本身具有合成各种营养成分的能力。20世纪初，海宁 (E.Hanning)就对萝卜等比较成熟的胚进行了培养，并获得了可移植的实生苗（见图）。而未分化的幼胚所需的培养基成分比较复杂，除了一般的无基盐外，还需加入微量元素和各种生长调节物质。虽然早在30年代，中国李继桐等已发现银杏胚乳提取物对离体培养银杏胚有促进作用，梵奥佛罗克(Van.Overoeek)在40年代发现加入椰乳培养幼胚就能正常发育分化，但由于培养技术的限制以及对幼胚发育所需要的营养尚缺少全面了解，因此，研究幼胚的培养条件，特别是研究各种生长物质对幼胚的影响仍然是是一个艰巨的任务。

胚培养embryo culture

分离出的植物胚在培养基上的离体生长。可以分为成熟胚培养和幼胚培养两类。植物胚培养可以作为一种育种手段，在农、林业上加以应用，其实用意义在于：
❶克服远缘杂交中的杂种不育；
❷缩短育种周期；
❸克服种子的自然不育性；
❹测定种子生活力；
❺应用于理论研究，如胚发生所需条件、胚乳对胚的作用、胚胎组织对生长物质的反应等，都可以借助胚胎培养方法去研究解决。