生物素-亲和素试验biotin-avidin test

生物素-亲和素系统(biotin-avidin system,BAS)是一种新型生物反应放大系统。由于其有特殊的放大作用，可显著提高检测的敏感性，又具有高度特异性及稳定性，故已广泛应用于酶联免疫、放射免疫及荧光免疫等检测技术中。生物素是一种在动植物体内广泛存在的生长因素，尤其是蛋黄、肝和肾等组织中含量较高，它以辅酶形式参与多种羧化酶反应，故称为辅酶R或维生素E，现已能人工合成，有商品供应。亲和素是一种分子量68,000的碱性糖蛋白，对生物素有很强的亲和力，是抗原抗体反应的百万倍，两者一旦结合就难以解离，且酸、碱、有机溶剂、蛋白酶均不影响两者的结合。该系统一端偶联大分子反应物质、一端连接标记或支持材料，并产生多级放大作用，从而建立了多种灵敏度高，特异性强，方便快速的检测方法。BAS用于检测的方法比较多，最常用的方法为ABC(avidin-biotin complex)法：预先按一定比例将亲和素和酶共温，使形成复合物(ABC)，当ABC与生物素化的抗体接触时，ABC中尚未饱和的亲和素结合部位可与抗体分子上的生物素相结合，使抗原抗体反应系统与ABC连成一体达到检测目的。主要用于细胞表面组分的测定和定位；如巨噬细胞表面FC受体、红细胞表面抗原、T细胞表面分化抗原、肿瘤细胞表面抗原和各种受体；可溶性抗原及其相应抗体的检测，如细菌性抗原或抗体、病毒性抗原或抗体；IgE、IgG等免疫球蛋白的检测；核酸的研究；肿瘤的免疫治疗等。