氰化物-抗坏血酸盐试验

氰化物-抗坏血酸盐试验是一种诊断红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏的过筛试验。阴性可排除G6PD缺乏。它是根据血红蛋白与加入的抗坏血酸钠作用生成过氧化氢，并利用氰化物对过氧化氢酶的抑制作用，使产生的过氧化氢不被破坏。此时，过氧化氢可与还原型谷胱甘肽(GSH)反应，生成氧化型谷胱甘肽(GSSG)，这种GSSG能将还原型辅酶II变为氧化型辅酶II，后者可激活磷酸戊糖旁路，维持还原功能。当红细胞中缺乏G6PD时，则磷酸戊糖旁路有缺陷而不被激活，过氧化氢乃将血红蛋白氧化为棕色的高铁血红蛋白。这种色泽的改变，肉眼即能看出。若红细胞中不缺乏G6PD，则GSH活性正常，过氧化氢便被还原而失去作用，血红蛋白不变色。具体方法是取肝素抗凝血与空气充分接触，将此血液加入含有抗坏血酸钠和葡萄糖的试管中，然后加氰化钠少许，在37℃水浴中温育3h，将血液摇匀，肉眼观察血液色泽变化。血液呈鲜红色，为阴性反应。血液为棕色，且色泽深而暗，为阳性反应。本试验结果与G6PD含量、谷胱甘肽稳定试验等基本相一致。正常人阴性，G6PD缺乏者为阳性。当血液标本陈旧或存在游离血红蛋白时，结果可呈假阳性。本试验原设计检测血红蛋白的过氧化变性，作为G6PD缺乏症的过筛试验，方法简便易行且较敏感，但特异性不高，如在谷胱甘肽过氧化物酶缺乏，不稳定血红蛋白症Koln、Santa Ana及血红蛋白H中可呈强阳性。谷胱甘肽还原酶缺乏和丙酮酸激酶缺乏时亦呈阳性。必要时需配合其它试验予以鉴别。