比色法colorimetry

利用光线分别通过有色的标准溶液和被测物质溶液，根据透射亮度的不同，以测定被测物质含量的光学分析法。具有简单、快速、灵敏度高等特点，特别适用于微量组分的测定。比色法应用很广泛，可用于测定多种元素、有机化合物及某些气体等，在农药分析中是一种重要的定量手段。
原理 用比色法进行定量分析是以朗伯—比尔定律(Lambert-Beer′s law)为依据的。即当一束平行的单色光通过含有吸光物质的溶液时，一部分光透过溶液，一部分光被溶液所吸收，物质的吸光度与溶液浓度和液层厚度成正比，透过溶液的光亮度(I)与入射光亮度(I₀)之比称为透光度(T):

将透光度T的倒数取常用对数的量称为吸光度(A)，即：

在比色分析中，当入射光亮度一定时，液层厚度保持不变，则测得的吸光度A与溶液的浓度c成直线关系。在实际应用时，首先选择被测物质溶液的最大吸收波长(λ_max)，在最大吸收波长时进行比色，灵敏度最高，然后配制一系列不同浓度的标准溶液，在一定条件下进行显色，分别测定它们的吸光度，将测得的吸光度与浓度的关系作图，得到一条直线，称为标准曲线。测定未知试样时，应在与绘制标准曲线相同的条件下进行显色，测定其吸光度，从标准曲线上查得试样的浓度。
仪器 最早应用目视比色法，由于用肉眼观察颜色的深浅误差较大，以后改用光电比色计进行测定，光电比色法是利用光电池或光电管测量透过有色溶液后的光亮度，测定时需要放置滤光片，误差较大。目前多采用具有分光系统（单色器）及检测器的分光光度计，使测定结果准确、省时，选择性好。
应用 农药的比色测定有三种类型： ❶农药有效成分本身带有颜色，可以直接进行比色。如敌磺钠原药为黄棕色，在波长435纳米处有最大吸收峰，但这种类型的农药较少；
❷经化学反应可以生成有色化合物。如对硫磷，经碱解后形成对硝基酚而呈黄色，可在420～480纳米波长范围内测量吸光度。
❸引入显色基团生成有色化合物。如农药经醇、碱水解产生酚类或芳胺，可与偶氮试剂进行偶合形成有色化合物。例如氨基甲酸酯的甲萘威等，经碱解后生成α-萘酚与对硝基苯偶氮硼氟酸甲醇溶液反应，形成黄色可以在590纳米处测定吸光度。

比色法colorimetry

指比较溶液颜色深度以测定所含有色物质浓度的方法。分为目视比色法和光电比色法。若物质本身为无色，可在适当条件下与某些试剂作用生成有色物质，再用比色法测定。

比色法

colorimetric method