日本血吸虫检查
寄生人体的血吸虫有日本血吸虫、曼氏血吸虫及埃及血吸虫三种。国内流行的仅有日本血吸虫 (简称血吸虫)。诊断以从粪便中找到典型虫卵为最可靠的依据。
血吸虫病原检查 从粪便中检出虫卵或孵出毛蚴,就可确定有血吸虫感染。但在感染轻者、晚期患者及治疗未愈者,粪便中虫卵数少,检出率低,故粪检阴性,不能完全排除血吸虫病。直接涂片镜检由于标本取材少,故检出率低,仅适用于感染严重的早期病人。集卵镜检: 取30g粪便,加水搅成糊状,过滤,除去粗粪渣,静置,使卵自然沉淀于容器底,或用尼龙袋尼龙绢260目/英寸)集卵后,取沉淀物涂片镜检。此法检出率高于直接涂片法。孵化法: 利用血吸虫卵能在25~30℃清水 (pH=6.8~7.8,无氯、无盐)中孵出毛蚴的特点,向自然沉淀集卵法所得的沉淀中,加水进行孵化。孵出的毛蚴大多数可保持活动10h左右,故观察毛蚴应在孵化的前8h内每隔两小时观察一次为宜。毛蚴易与原生动物混淆,如使用河水孵化时,需加热至70℃先将河水中的原生动物杀死,冷却后再用孵化法。与集卵镜检相结合,比单一方法的检出率高。但检出率的高低还与检查时用粪量及送验次数密切相关。直肠粘膜活体组织检查: 用直肠镜夹取疑似含虫卵结节的粘膜病变组织,压在两块载玻片之间镜检。对未经治疗的病人,若检出虫卵,不论虫卵死活,均有诊断价值;对有治疗史的患者,只有查见活卵或近期变性虫卵,才有诊断价值。死活虫卵的鉴别,需要有实践经验,以免误诊。
血吸虫免疫学检查
❶皮内试验: 是利用宿主机体变态反应的局部皮肤表现,来诊断有无血吸虫感染的速发型超敏反应。注入皮内的血吸虫抗原使局部皮肤产生丘疹与红晕,丘疹直径扩大至0.8cm以上者,为阳性反应,<0.8cm以下者,为阴性反应,此法敏感性虽较高,但易出现假阳性,可作为普查过筛和临床辅助诊断。
❷环卵沉淀试验: 是以日本血吸虫成熟卵中毛蚴代谢产物为抗原,与受检查血清作用,观察卵周有无沉淀的一种免疫学试验。如被检查者已感染日本血吸虫,则其与血吸虫卵的抗原性物质结合在虫卵的周围形成泡状,花瓣状或细卷曲状沉淀物,即为阳性反应。阳性程度一般以“+”表示: “+”卵周有少量小的球状或指状沉淀,“++”卵周沉淀呈丝带状,“+++~++++”卵周被2/3的各种形态的沉淀占据。为说明反应的强弱,可数片上的全部成熟卵数和阳性反应卵数,求出环沉率。环卵沉淀试验具有较高的敏感性和特异性,与粪检阳性的符合率在95%以上,对无治疗史的日本血吸虫病患者,其诊断价值比较肯定,如环卵试验阳性,环沉率≥5%,体征阳性(肝在剑突下3cm以上或伴有脾肿大),再加上皮内试验阳性,虽病原学检查阴性,也可给以诊断性治疗。环卵试验还可用以观察疗效,治疗奏效时,环卵试验的阳性程度和环沉率下降。
❸尾蚴膜试验: 原理同环卵试验。以活尾蚴为抗原,与被检查的血清作用,如患者血清内含有相应的抗体,则在尾蚴体表有胶状膜形成,为阳性。尾蚴膜反应与粪检的阳性符合率也在95%以上,对无治疗史的血吸虫病患者有一定的诊断价值,特异性也较高,对肝吸虫和肺吸虫偶有交叉反应,但由于作为抗原的活尾蚴不易取得,且对人有感染性,临床使用受到一定限制。
❹间接血凝试验:将日本血吸虫卵的可溶性抗原吸附于醛化的绵羊红细胞表面,使致敏红细胞与被检血清作用,如被检血清中有相应抗体则红细胞发生凝集,即阳性反应。亦可将抗血吸虫的抗体吸附在醛化红细胞表面,使与宿主体内血吸虫的分泌代谢产物(循环抗原)结合,称反向间接血凝试验。血凝试验操作方便,器材简单,敏感性和特异性强。对日本血吸虫病急慢性患者的阳性检出率达92~100%,在非疫区的正常人群中,假阳性率在4%以下。目前认为间接血凝试验比尾蚴膜试验和环卵沉淀试验更为敏感,可作为普查用。本试验不适于作为观察疗效的指标,因宿主体内的抗体,并不因为药物杀灭虫体后而很快消失。
❺酶联免疫吸附试验: 是最新发展的一种灵敏度高、特异性强的血清学检查方法,现正在探索其在血吸虫病诊断中的实用价值。
❻胶乳凝集试验,其基本原理同间接血凝试验。只是将血凝所用载体(羊红细胞或人“O”红细胞)改用聚苯乙烯胶粒。本试验在日本血吸虫病诊断时,假阳性反应较高。
❼免疫荧光技术: 利用某些荧光素在一定条件下,可与抗原或抗体结合而不影响其免疫活性。将荧光标记物作为试剂,然后在组织切片或涂片上进行浸染,使与对应抗体或抗原进行反应。通过荧光显微镜观察能作组织上的抗体或抗原的定位。此法具有免疫学的敏感性和特异性及显微镜的精确性。
❽对流免疫电泳: 将可溶性抗原与抗体分别加入平行成对的小孔中,抗原加入近阴极孔,抗体加入近阳极孔,在通电的琼脂中抗原和抗体向相反的电极移动。在二者相遇的最适比例处,形成白色沉淀线。方法简便,能在短时间完成,可作快速诊断用。用于诊断日本血吸虫病与粪检阳性符合率在70~80%左右。
❾琼脂扩散试验:利用可溶性抗原、抗体在含电解质的半固体琼脂内反应。当抗原与抗体相对应时,形成白色沉淀线,并能长时间保持固定位置,便于观察结果,并可染色保存。