放射层析法与放射电泳法

用层析法和电泳法分离含标记化合物的样品，并用各种射线探测仪器测量被分离化合物的放射性活度，这些方法分别称为放射层析法和放射电泳法。它们往往是核素示踪、竞争放射分析、酶的放射化学测定、放射酶促分析、活化分析以及标记化合物制备等技术的重要组成部分。
定位 被分离标记物在层析谱或电泳谱中的定位或鉴定，可以用标记的或非标记的标准物质为参照物。定位方法有射线探测或其他检测法。在后一类中常用的有紫外检测法以及不影响射线测量或不引起放射性损失的显色法等。射线探测法在多数情况下与层析谱或电泳谱的放射性测量方法相同。薄支持介质上放射性斑点或区带的定位，也可用放射自显影法(见“生物医学中的放射自显影术”条)或与之类似的“火花放电”室法。但是某些物质的标记与非标记物的位置可能稍有差异。如用离子交换法分离14C或3H标记氨基酸时，某些氨基酸的放射性峰与质量峰不相重合(见“同位素效应”条)。
定量测量 分为薄支持介质的放射层析法和放射电泳法、液相放射层析法和气-液相放射层析法。
薄支持介质的放射层析法和放射电泳法 各种纸层析和纸电泳、薄层层析、平板电泳等均使用薄支持介质（凝胶柱干燥成片后亦可归属于此类）。这种薄支持介质上放射性斑点或区带的定量测量，可用扫描法，即针对不同射线选用不同探测器，薄支持介质在两个探测器之间或一个探测器之下移动，斑点或区带的放射性由计数率仪和自动描记系统绘出峰形曲线图； 或者由定标器和数字打印系统间歇地将放射性计数打印在纸带上，然后计算出放射性峰的面积或每个斑点或区带的总计数。为求得较准确的结果，扫描时，要控制和调节准直狭缝的宽度、探测器与支持介质的距离、计数率仪的时间常数和支持介质的行进速度等因素。但支持介质的厚度和干燥条件等有时难以很好控制。因此，对软β射线源的标记物，若将每一层析纸条的放射性峰进行定量比较是不理想的，而比较每一层析纸条上两峰的放射性比值却是可取的。用这种方法来定量，具有简单、快速的优点。
对软β射线源比较满意的定量测量法是： 根据定位结果剪下或刮下放射性斑点或区带，或者把整个谱切割成等宽片段，然后用溶剂抽提法或燃烧法等制样，并进行测量。有时也可以用非均相液体闪烁测量法直接测量薄片或刮取物的放射性活度。
液相放射层析法 分为液体样品的不连续测量与连续测量二种。
(1)液体样品的不连续测量： 用分部收集器收集洗脱液，取一部分做质量测定，另一部分做放射性测量。后者可根据核素种类不同而采用不同的测量仪器和测量方法。
(2) 液体样品的连续测量： 在两个光电倍增管之间装有充满闪烁剂晶体的小室或壁内（壁外）有闪烁体的盘旋小管，用恒流泵使层析柱的洗脱液连续通过小室或小管。放射性计数由自动记录系统记录下来。还可以让液体随后通过分光光度计进行质量测定。另一种方法是使洗脱液分成两支，一支流经分光光度计质量测量系统，另一支与闪烁液混合而通过测量小室。仪器可同时绘出两个峰形曲线图。
气-液相放射层析法 分为流出气的不连续测量与连续测量二种。
(1) 流出气的不连续测量： 流出气的放射性峰经吸收剂吸收或冷凝，然后进行放射性测量。吸收的方法有：吸收在含碱液的闪烁液中； 吸收到浸有非挥发性有机溶剂的棉花上； 吸收在涂有硅油的蒽晶体或对-联三苯晶体上或吸收在活性炭上。冷凝法有： 直接冷凝在闪烁液中，或冷凝在小管中再经溶剂洗出。
(2) 流出气的连续测量： 气体可以经层析系统的质量测量装置，然后被引入放射性测量装置。这样便得到两种记录结果的峰形图。射线测量系统的设计也有所不同，气体可直接被吸收在闪烁液中，连续测量并记录；或者使流出气通过加热转运管道而以气态进入流气式计数管或电离室。
但有些气体在进行上述测量时可能引起假计数或淬灭作用。故目前多使气体先经过燃烧管烧成CO2等永久性气体，然后引入流气式计数管、电离室或装有蒽晶体小管的液体闪烁计数器。燃烧方法有氧化法和加氧裂解法两种。前者效率较高，但有时出现记忆效应。
在上述三大类测量法中，所有连续测量法（包括定量扫描）的准确性和精密度都不如不连续测量法，但连续测量法简单、快速，且易于自动化。