嗜中性粒细胞碱性磷酸酶钙钴染色法neutrophil alkaline phosphatase with gomori stain method

嗜中性粒细胞内的碱性磷酸酶在碱性环境(pH 9.0～9.8)中，经镁离子激活后能使磷酸酯(β-甘油磷酸钠)水解为磷酸钠和甘油 ，磷酸钠再与氯化钙、硝酸钴、硫化铵发生一系列化学反应，最后生成棕黑色的硫化钴定位于胞浆中。结果判断：
❶阳性反应主要见于粒系成熟阶段的细胞，表现为胞浆中出现灰色～棕黑色沉淀（颗粒）。
❷判断标准及分级情况：“0”胞浆呈淡红色，其中无任何灰黑色颗粒；“+”胞浆呈均匀浅灰色，无颗粒或有少量细小灰黑色颗粒，但不超过胞浆总面积的1/4；“++”全部胞浆呈均匀灰黑色或出现较粗的黑色颗粒，但不超过胞浆的1/2；“+++”胞浆中已基本充满棕黑色颗粒，但是其密度较低；“++++”全部胞浆充满粗大棕黑色颗粒而呈深黑色甚至掩盖其胞核。
❸计算积分值：油镜下计数100个中性杆状核、分叶核细胞，分别记录其分级情况，全部阳性反应细胞之和即阳性率。将所有阳性反应细胞均以“+”级表示后计算其积分值。
例：某病人在计数100个中性粒细胞时，其NAP反应情况为：

则其NAP阳性率为90%; 积分值为200[20+2(40)+3(20)+4(10)]。 临床意义：
❶NAP参考值：因各实验室条件不同，差别很大，健康成人阳性率一般在40%以下。NAP积分值一般多在80分以下，以弱阳性者为主。
❷化脓性感染时NAP活性明显增强，病毒性或寄生虫感染时无明显变化。
❸急性淋巴细胞性白血病、淋巴肉瘤、骨髓纤维化时NAP活性明显增强。而急、慢性粒细胞白血病减低，但慢性粒细胞性白血病急性变时NAP活性增强。恶性肿瘤时NAP活性也可明显增强。
❹再生障碍性贫血时NAP活性增强，其它类型贫血多无改变。
❺垂体-肾上腺皮质功能亢进及应用皮质激素时NAP活性增强。
❻妊娠2～3个月后NAP活性即增高，6个月以后积分值可达200左右，说明雌激素对NAP活性有一定影响。