免疫荧光检查

免疫荧光检查是用荧光素标记的特异抗体或抗原，处理细胞切片或细胞涂片，在荧光显微镜下检查有无相应抗原或抗体存在。这项检查对确定肾脏病的诊断和了解其发病原理很有帮助。
免疫荧光检查法有二种：
❶直接免疫荧光法： 将荧光素标记的特异抗体加在待检标本上孵育，观察标本是否有相应的抗原或免疫反应物 （如免疫球蛋白或补体） 存在。
❷间接免疫荧光法： 应用未经荧光素标记的特异抗体（称第一抗体）与待检组织切片孵育，如标本上存在相应的抗原，此特异抗体会与标本中的抗原相结合，然后再用荧光素标记的特异性抗抗体（称第二抗体）处理，使第一抗体与第二抗体结合，这时用荧光显微镜检查，将显示有荧光结合物（即第二抗体）的存在，间接地表示待检组织上存在着所要寻找的特异抗原和其分布部位。间接免疫荧光法的特点，在于对多种试验只需制备单一的荧光标记的抗体（第二抗体）。同时由于间接法能有较多的标记抗体与第一抗体接触，所以增加了试验的敏感性。免疫荧光检查的临床意义：
❶对免疫复合物型肾炎的病因诊断有帮助。如急性链球菌感染后肾小球肾炎，可在肾标本中找到链球菌膜抗原； 如在肾活检组织中找到乙型肝炎表面抗原，则有助于乙型肝炎复合物肾炎的诊断。在甲状腺球蛋白所致肾炎，可找到甲状腺球蛋白；在狼疮性肾炎，可找到DNA; 在疟疾后肾炎，可找到疟原虫抗原。
❷帮助了解发病原理。如急、慢性肾小球肾炎，通过免疫荧光检查证明有免疫球蛋白IgG和 （或） IgM和补体C3存在，说明发病与免疫有关。在妊娠肾病患者，免疫荧光检查无免疫球蛋白及C3存在，其发病可能与这些免疫体无关。在肾小球上如见到纤维蛋白原和纤维蛋白及其降解产物，表明在发病过程中，这些物质是起了作用。
❸鉴别不同类型的肾炎。如在抗肾小球基膜型肾炎，则沉积在肾小球基膜上的荧光抗体呈线条状。而免疫复合物型肾炎则呈颗粒状。
免疫酶标技术： 酶标记技术是将酶 （常用的是辣根过氧化酶）与抗原或抗体结合，使其保持免疫学与生物化学特性，然后与相应抗体或抗原反应，形成酶标记的免疫复合物，结合在免疫复合物上的酶在遇到相应底物时，使后者产生水解、氧化或还原等反应，生成有色物质。酶降解底物的量与呈现的色泽成正比，由此可以反映被测的抗原或抗体量，从而不仅可以定性地而且可以定量地检测抗原或抗体。
欲进行肾活体组织标本内抗原或抗体检查时，酶标记的抗体与相应抗原进行免疫组织化学反应，产生有色沉淀物，不但能在光镜下作定位研究，而且可用电镜在分子水平上进行抗原（抗体）超微结构观察，是本法优点之一。