5′-核苷酸酶5′-nucleotidase,5′-NT

是一种特异的水解酶。EC3.1.3.5，能催化5′-核苷酸的水解而得磷酸和核糖核苷。广泛存在于人体组织中，在肝内此酶主要存在于胆小管窦状隙膜内。肝胆疾病、肝内胆汁淤积和梗阻性黄疸等患者血清5′-NT常可增高2～6倍。基于5′-NT可水解5′-磷酸腺苷(AMP)生成腺苷和磷酸。测定方法有两种：
❶使用钼酸铵试剂使磷酸结合生成磷钼酸，再以氨萘磺酸试剂使其还原成钼蓝。蓝色的深浅与释出的磷酸成正比，从而求出该酶的活力。为防止碱性磷酸酶(ALP)对该实验的影响，在反应体系中加入镍离子作为5′-NT的抑制剂而ALP不被抑制；不含镍离子试管产生的磷，代表5′-NT和ALT两种酶的总和，含镍试管只代表ALP的活力。两者之差代表5′-NT活力。
❷基于反应中生成腺苷，在反应体系中加入腺苷脱氨酶，使腺苷水解成氨，再通过Bertherot反应测定氨；氨的测定还可通过大反应体系中加入工具酶谷氨酸脱氢酶，测定340nm处NADH吸光值下降程度。腺苷还可通过265nm处的吸光度获得，此时可加入足量磷酸甘油使其与ALP活性中心结合，从而阻止ALP与AMP结合。血清5′-NT参考值为2～17U/L。