大豆酒精脱氢酶电泳法

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1．样品提取缓冲液 称取十二烷基磺酸钠(SDS)溶液在0．1N醋酸钠(pH8．0)中，配成0．1%提取缓冲液。

2．样品提取和电泳 将吸胀种子的子叶(25℃浸4小时)，用0．1%SDS溶液提取。电泳同蛋白质。

3．染色 取10．5ml95%酒精、7．5mg PMS(吩嗪甲基硫酸盐)、26．7mg NBT(硝基蓝四唑)和45mg NAD(辅酶Ⅰ)溶解在150ml 50mM磷酸二氢钠(pH7．0)溶液中，配成染色液。染色时，将胶板(或柱)浸入，25℃黑暗下15－30分钟。

4．品种鉴定 按不同品种，其酶带数目和Rf值不同，区分不同品种。

【参考文献】：

〔1〕西北农业大学编(1978)，作物育种学，P531－542，农业出版社。

〔2〕王金陵编(1957)，大豆品种纯度检验，黑龙江省农业厅种子处印。

〔3〕陶嘉龄(1981)，种子生理和种子标准，P15－20，浙江农业大学农学系种子教研组整理印刷。

〔4〕浙江省农科院育种栽培所着(1964)，农作物田间试验记载项目及试行标准，PP74－79，《浙江农业科学》编辑部。

〔5〕B．J．Cardy et al(1984)．Identification of Soybean Cultivars using isoenzyme electrophoresis，Seed Sci．& Technol，12：943－954。