乳牛布氏杆菌病全乳环状反应操作技术

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1．受检乳须为新鲜的全脂乳，凡腐败、变酸和冻结的不能用(采集的乳夏季应于当天内检查，如保存于2℃时，7天内仍可使用)

2．采乳时应将母畜的乳房用温水洗净，再用纱布擦干，然后挤于洁净的器皿中。

3．操作方法。

(1)操作时取4个乳头的乳相混合的新鲜全乳1毫升盛于灭菌小试验管中。

(2)按抗原标签的规定加入全乳环状抗原1滴(约0．05毫升)，充分振荡混合。

(3)置37－38℃水浴中60分钟。

(4)加温后小心取出试管勿使振荡，立即进行判定。

4．判定标准。目前我国生产两种全乳环状反应抗原，一种是苏木素染色抗原，呈蓝色；另一种是四氮唑染色抗原，呈红色。试验时不论哪种抗原，均按乳脂的颜色和乳柱的颜色进行判定。

强阳性反应(+++)：乳柱上层的乳脂形成明显红色或蓝色的环带，乳柱呈白色，分界清楚。

阳性反应(++)：乳脂层的环带虽呈红色或蓝色，但不如“+++”显着，乳柱微带红色或蓝色。

弱阳性反应(+)：乳脂层环带颜色较浅，但比乳柱颜色略深。

疑似反应(±)：乳脂层环带不甚明显，并与乳柱之分界模糊，乳柱带有红色或蓝色。

阴性反应(一)：乳柱上层无任何变化，乳柱呈均匀浑浊的红色或蓝色。

脂肪较少或无脂肪的牛乳呈阳性反应时，菌体呈凝集现象下沉管底，判定时以乳柱的反应为标准。

5．患乳房炎、其他乳房疾病母牛的乳、初乳、脱脂乳及煮沸过的乳不能作环状反应用。