(7)糙米、稻壳、植株、土壤和田水中残留量检测方法

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浙江省农业科学院农产品质量标准研究所 朱亚红 于志光

样本用甲醇提取，SPE-C₁₈柱净化，高效液相色谱法(UV)测定

1．主要仪器及设备

高效液相色谱仪 紫外检测器(UV)

台式恒温振荡器

匀浆机

组织捣碎机

旋转蒸发器

恒温水浴锅(±2℃)

2．主要试剂

乙腈(色谱纯)、甲醇、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、氯化钠、盐酸

SPE-C₁₈柱

吡虫啉标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 糙米、稻壳、稻秆、土壤

称取20g土壤(以干重计算)或10g粉碎稻秆、20g糙米、20g稻壳置于500mL平底三角烧瓶，用100mL甲醇浸泡，捣碎。再浸泡1h，振荡30min，过滤。再用80mL甲醇振荡30min，过滤。合并滤液于500mL分液漏斗中。

3．1．2 田水

量取田水100mL直接置于500mL分液漏斗中。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

在分液漏斗中加入100mL5%氯化钠溶液和100mL石油醚，振摇，静止分层，下层水相放入另一分液漏斗。石油醚相用50mL5%氯化钠反萃取1次，弃去石油醚。合并水相，加入0．5mL6mol／L盐酸，摇匀，用40mL、40mL、20mL二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠脱水，用旋转蒸发器减压浓缩至干。

3．2．2 柱净化

取SPE-C₁₈柱，用10mL甲醇预淋，至干，再用无离子水预淋，至干。用10mL石油醚／乙酸乙酯(8．5∶1．5，V／V)将样本残余物分3次转入柱中，淋出液弃去。用石油醚／乙酸乙酯(3∶7，V／V)洗脱，收集10mL洗脱液，浓缩至干，用甲醇定容至10mL。待测。

3．3 高效液相色谱法测定

检测器 UV

波长 270nm

色谱柱 HP ODS，250mm×4mm×5μm

柱温 30℃

流动相 乙腈／水(40∶60，V／V)

流速 1mL／min

进样量 20μL

保留时间 4min22s

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1×10^－9g。

最低检测浓度 糙米、稻秆和稻壳均为0．05mg／kg，土壤0．02mg／kg，田水0．005mg／L。

回收率 各类样本中添加吡虫啉浓度为0．1～5．0mg／L时，平均回收率为76．1%～107．4%。见表1-21-13。

相对标准偏差 0．8%～18．0%，见表1-21-13。

表1-21-13 糙米、稻壳、稻秆、土壤和田水中吡虫啉添加回收率及相对标准偏差实验结果