(6)苹果和土壤中残留量检测方法(方法一)

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山西省农业科学院植物保护研究所 秦曙 王霞 乔雄梧 朱九生 周华

样本用甲醇提取，C₁₈柱净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

旋转蒸发器

循环水式多用真空泵

分散器

普通摇床

氮吹仪

固相萃取装置

2．主要试剂

石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、浓盐酸

无水硫酸钠 550℃灼烧4h

SPE-C₁₈柱 200mg

吡虫啉标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 土壤

称20．0g过2mm筛后的土壤样本置于250mL具塞三角瓶中，加100mL甲醇振荡提取60min。经快速定性滤纸抽滤，用50mL甲醇冲洗三角瓶及漏斗，合并滤液，待净化。

3．1．2 苹果

称取10．0g切碎后混匀的苹果样本于250mL高脚烧杯中，加100mL甲醇，匀浆1min，加2g助滤剂545，再匀浆10s。经快速定性滤纸抽滤，用50mL甲醇冲洗烧杯及漏斗，合并滤液，量取75mL(相当于5g样本量)，待净化。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将上述滤液置于500mL分液漏斗中，加入100mL5%氯化钠溶液，摇匀。用100mL石油醚洗涤，分出水相。石油醚相用50mL5%氯化钠溶液反萃取。合并水相，加入0．5mL6mol／L盐酸溶液，用40mL、30mL、30mL二氯甲烷萃取，每次1min。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠(用二氯甲烷预淋)过滤于250mL三角瓶中，用旋转蒸发器(40℃)慢蒸至干，加入2mL石油醚溶解残余物，待柱净化。

3．2．2 柱净化

取SPE-C₁₈柱置于固相萃取装置上，用10mL甲醇预淋，至干。再用10mL去离子水预淋，至干。将3．2．1石油醚溶液转入柱中，并用10mL石油醚分3次洗瓶后转入柱中，弃去淋出液。用石油醚／乙酸乙酯(3∶7，V／V)洗脱，收集10mL洗脱液，浓缩至干，用甲醇／水(1∶1，V／V)定容，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

波长 270nm

色谱柱 kromasil，C₁₈，250mm×4．6mm×5μm，100A

流动相 甲醇／水，(1∶1，V／V)

流速 0．8mL／min

进样量 20μL

保留时间 约为5．1min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1．0×10^－9g。

最低检测浓度 苹果0．05mg／kg，土壤0．025mg／kg。

回收率 土壤、苹果中添加吡虫啉0．05～2．00mg／kg时，平均回收率分别为82．7%～90．5%、90．2%～97．4%。见表1-21-11。

相对标准偏差1．1%～2．4%，见表1-21-11。

表1-21-11 苹果和土壤中吡虫啉添加回收率及相对标准偏差实验结果