(2)苹果和土壤中残留量检测方法

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农业部农药检定所 龚勇 秦冬梅 高晓辉

样本用丙酮提取，氧化铝／硅胶混合柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外检测器(UV)

振荡器

组织捣碎机

旋转蒸发器

层析柱 Φ20mm×300mm，带聚四氟乙烯旋塞

2．主要试剂

丙酮、甲醇、石油醚(30～60℃)、乙酸乙酯、甲苯、无水硫酸钠、硅胶(75～150目)

酸性氧化铝柱层析用，130℃处理4h，加5%水减活

SPE-C₁₈柱用10mL甲醇和20mL水依次预淋活化，备用

唑螨酯标准品

3．检测步骤

3．1 提取

称取50g捣碎的苹果样本(土壤50g过20目筛)于500mL具塞锥形瓶中，加入150mL丙酮，震荡提取1h，抽滤。残渣用30mL×3丙酮洗涤。合并滤液，浓缩至约10mL。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将上述浓缩液转入分液漏斗中，加入100mL10%氯化钠水溶液，用40mL×3石油醚萃取。合并石油醚相，经无水硫酸钠层脱水，浓缩至干。

3．2．2 柱层析净化

层析柱用石油醚湿法装柱，依次装入脱脂棉、2g无水硫酸钠、10g酸性氧化铝、硅胶10g和2g无水硫酸钠。将石油醚液面降至柱顶。用20mL×3石油醚／乙酸乙酯(9∶1，V／V)溶解浓缩物、洗涤容器并依次转入柱中淋洗，弃去淋出液。用150mL石油醚／乙酸乙酯(6∶4，V／V)溶液洗脱并收集，浓缩至干。用2mL甲醇／水(3∶2，V／V)溶解残渣并转入SPE-C₁₈柱中，用4mL甲醇／水(3∶2，V／V)溶液淋洗并弃去。再用5mL甲醇／水(9∶1，V／V)洗脱并收集，定容至5mL，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 UV

色谱柱 C₁₈柱，300mm×4mm

流动相 甲醇／水(4∶1，V／V)

流速 1．0mL／min

进样量 20μL

保留时间 18．0min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 2×10^－9g。

最低检测浓度 0．01mg／kg。

回收率 苹果中添加唑螨酯0．05～0．20mg／kg时，平均回收率为68．0%～96．0%；土壤中添加唑螨酯0．10～0．50mg／kg时，平均回收率为83．0%～88．0%。见表1-19-3。

相对标准偏差 3．5%～7．9%，见表1-19-3。

表1-19-3 苹果和土壤中唑螨酯添加回收率及相对标准偏差实验结果