(2)玉米籽粒和土壤中残留量检测方法

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吉林农业大学资源与环境学院 逯忠斌 刘伊玲 徐威 张浩 王岩

样本用甲醇／水提取，经三氯甲烷萃取，硅胶／活性炭柱层析净化，液相色谱法(UV)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 紫外可见分光光度检测器(UV)

谷物粉碎机 (JZ09A-4型)

振荡器

组织捣碎机

真空旋转蒸发器

层析柱 Φ15mm×200mm

2．主要试剂

甲醇、丙酮、三氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、无水硫酸钠、盐酸、氯化钙、层析硅胶、活性炭、助滤剂Celite545

唑嘧磺草胺标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 玉米

取40g玉米粉，置于具塞锥形瓶中，加入60mL甲醇／水(8∶2，V／V)，振荡提取30min，在铺有助滤剂的布氏漏斗中减压抽滤。用70mL甲醇／水(8∶2，V／V)淋洗滤渣。

3．1．2 土壤

取50g样本，置于具塞锥形瓶中，加入70mL甲醇／水(9∶1，V／V)，振荡提取1h，在铺有助滤剂的布氏漏斗中减压抽滤。用70mL甲醇／水(9∶1，V／V)淋洗滤渣。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

3．2．1．1 玉米

合并滤液于分液漏斗中，加入100mL0．1mol／L氯化钙溶液，用40mL、40mL、40mL正己烷振荡洗涤3次，弃去正己烷相。用40mL、40mL、40mL三氯甲烷萃取3次。合并三氯甲烷相，经无水硫酸钠层脱水，用旋转蒸发器(40℃)减压浓缩至干，用1mL乙酸乙酯溶解残渣，待柱层析净化。

3．2．1．2 土壤

合并滤液于分液漏斗，加入70mL0．1mol／L氯化钙水溶液，用盐酸调至pH2，用40mL、40mL、40mL三氯甲烷萃取3次。合并三氯甲烷相，经无水硫酸钠层脱水，用旋转蒸发器(40℃)减压浓缩至干，用1mL乙酸乙酯溶解残渣，待柱层析净化。

3．2．2 柱层析净化

在层析柱内依次加入1g助滤剂，0．5g助滤剂／活性炭(20∶1，W／W)及0．5g硅胶。用乙酸乙酯预淋。加入上述待净化液，用70mL乙酸乙酯淋洗并洗脱。弃去前20mL，收集后50mL洗脱液，用旋转蒸发器(40℃)减压浓缩至干，用二氯甲烷／甲醇(98．4∶1．6，V／V)定容，待测。

3．3 高效液相色谱法测定

检测器 UV

波长 226nm

色谱柱 Zobax SIL(Du Pont)4．6mm×25cm

流动相 二氯甲烷／甲醇(98．4∶1．6，V／V)，玉米籽粒测定时加0．1%冰乙酸

流速 0．9ml／min

进样量 5～10μl

保留时间 7～8min

4．结果计算

采用两点校正法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 1．0×10^－9g。

最低检测浓度 玉米籽粒0．01mg／kg，土壤0．002mg／kg。

回收率 玉米籽粒中添加唑嘧磺草胺0．02～0．50mg／kg，平均回收率为90．3%～93．5%；土壤中添加唑嘧磺草胺0．01～0．50mg／kg，平均回收率为88．0%～96．8%。见表3-19-2。

相对标准偏差 1．8%～4．5%，见表3-19-2。

表3-19-2 玉米籽粒和土壤中唑嘧磺草胺添加回收率及相对标准偏差实验测定结果