苹果和土壤中残留量检测方法(方法二)

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山西省农药检定所 马涛 牛伟平

样本用甲醇提取，二氯甲烷液-液分配，SPE-C₁₈柱净化，液相色谱法(DAD)测定。

1．主要仪器及设备

液相色谱仪 二极管阵列检测器(DAD)

台式恒温振荡器

高速匀浆机

旋转蒸发器

固相萃取装置

氮吹仪

2．主要试剂

甲醇(优级纯)、石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、浓盐酸、无水硫酸钠、氯化钠、助滤剂Celite545

SPE-C₁₈

吡虫啉标准品

3．检测步骤

3．1 提取

3．1．1 苹果

称取10g样本置于250mL高脚烧杯中，加入100mL甲醇，匀浆1min，加2g助滤剂，再匀浆10s，抽滤。用50mL甲醇冲洗烧杯与漏斗，合并滤液并定容至150mL，待净化。

3．1．2 土壤

称取20g样本置于250mL具塞三角瓶中，用100mL甲醇振荡提取60min，抽滤。用50mL甲醇冲洗三角瓶及漏斗，合并滤液并定容至150mL。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

将滤液转移至500mL分液漏斗中，加入100mL5%氯化钠水溶液，混匀。用100mL石油醚洗涤，分出水相。石油醚相用50mL5%氯化钠水溶液反萃取。合并水相，加入0．5mL6mol／L盐酸，用40mL、30mL、30mL二氯甲烷萃取，每次1min。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠(用二氯甲烷预淋)过滤于250mL三角瓶中，用旋转蒸发器(40℃)慢蒸至干，待柱净化。

3．2．2 柱净化

取SPE-C₁₈柱置于固相萃取装置上，用10mL甲醇预淋，抽干，再用10mL去离子水预淋，抽干。用2mL石油醚溶解浓缩残余物并移入柱中，用10mL石油醚分3次淋洗，弃去。用石油醚／乙酸乙酯(3∶7，V／V)洗脱，收集10mL洗脱液。取2mL洗脱液在氮吹仪上吹干，用甲醇／水(1∶1，V／V)定容至2mL，待测。

3．3 液相色谱法测定

检测器 DAD

波长 270nm

色谱柱 Hypersil ODS，250mm×4．6mm×5μm

流动相 甲醇／水(1∶1，V／V)

流速 0．8mL／min

进样量 20μL

保留时间 5．1min

4．结果计算

外标(峰面积)-标准曲线法定量

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 8×10^－10g。

最低检测浓度 苹果0．008mg／kg，土壤0．004mg／kg。

回收率 苹果、土壤样本中添加吡虫啉0．05～2．00mg／kg时，平均回收率分别为78．4%～87．3%、83．7%～90．3%。见表1-21-12。

相对标准偏差 3．5%～14．1%，见表1-21-12。

表1-21-12 苹果和土壤中吡虫啉添加回收率及相对标准偏差实验结果