角膜染色试验corneal staining test

检查角膜、结膜病的试验方法。(1)适应证：
❶角膜上皮剥脱，上皮细胞变性或死 亡病变处的显示；
❷结膜上的轻微病变显示；
❸角膜瘘的鉴别；
❹角膜移植术后，青光眼术后滤枕情况的观察。 常用的染色剂有荧光素孟加拉玫红、荧光素孟加拉玫红合剂、安秦蓝、四唑、四唑安秦蓝合剂、锥虫蓝、溴麝香草酚蓝、荧光散、苏丹Ⅲ、利沙明绿、美蓝、汞溴红、伊红、甲苯胺蓝等。选择合适的染色剂配制适当的浓度滴眼，每次10μl，相当于1滴药的1/5。滴药后应注意观察时间，应在数分钟、10min、20min后分别观察。检查角膜瘘及青光眼滤枕则应在滴药后即观察，30min内观察完毕。四唑染色应在4min以后观察。(2)生理染色：
❶荧光素：初滴以后，眼球前部有1层薄药膜，应用生理盐水冲洗后再观察。正常角膜偶可见染色点。60岁以下的正常眼超过9点以上者罕见。
❷孟加拉玫红：对正常眼一般不染色，但对个别人，特别是老年人，可在角膜上及邻近的球结膜上看到少数微细的红色小点，多局限于鼻下侧，也可见于泪阜及半月皱襞处。沿睑缘在睑板腺开口处后方的正常结膜上，可染成一点状红线，延伸至泪点周围，称Marx线。可能是沿着泪流，产生1种特殊的细胞变性之故。
❸安秦蓝：下穹窿结膜的黏液线条为蓝绿色。黏液的染色点常见于Marx线、泪阜部位，少数在角膜球结膜的鼻下区显示出染色点。
❹四唑：对正常眼偶有极少数染色者，Marx线区占5%，角膜占8%。(3)病理染色：
❶上皮变性：荧光素染色易于显示上皮缺损，包括角膜糜烂、损伤、上皮剥脱等。白光下呈荧光绿色。钴蓝光波下呈荧光黄色。角膜炎凡有上皮缺损者，不论是点状、线状、树枝状、或边缘性、匐行性溃疡均可着色，可见到角膜移植片表面有点状着色，边缘缝合处也被染色。角膜结膜的腐蚀伤，荧光素可以染色。异物存留在角膜上，在其周围可见一荧光素染色环。荧光素液在结膜囊内数分钟可显示角膜溃疡或基质病变的深度和角膜内皮受损的程度。
❷变性细胞：干性角膜炎上皮干燥变性时，孟加拉玫红染病变处为红色。角膜移植后发生排斥反应细胞便染为红色。角膜炎症，干燥的角膜结膜变性细胞均可被四唑染成红色。利沙明绿可染变性细胞为绿色。溴麝香草酚蓝染变性细胞，在酸性下为黄色，碱性时为蓝色。荧光散在白光下染变性细胞为棕色。
❸死亡细胞：孟加拉玫红、利沙明绿、溴麝香草酚蓝、荧光散等，可使变性和死亡细胞都被着色。但四唑只能染变性细胞，不能染死亡细胞；而锥虫蓝则只能染死亡细胞，却不能染变性细胞，可以利用这种染色特性来鉴别细胞是变性或是已死亡。用锥虫蓝孟加拉玫红合剂染色，死亡细胞染为蓝色，而变性细胞染为红色。在角膜移植术中，可用此法了解供体角膜内皮细胞的活性率，预测手术后角膜的透明率。
❹角膜瘘：青光眼术后滤枕的观察为将荧光素溶液滴入结膜囊内，不冲洗，可以观察到角膜瘘处的房水被染成绿色的细流。也可用此法观察青光眼术后滤枕是否有房水渗漏发生。
❺结膜囊分泌物：春季角膜结膜炎分泌物用甲苯胺蓝染色法呈蓝紫色或淡紫色。注意药物制备宜无菌操作，必要时还需加防腐剂。染色剂的酸度一般为中性，pH值均为7，有的可允许波动在5～9之间。