血浆卵磷脂胆固醇酰基转移酶测定
卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)是肝脏分泌的一种酶,被高密度脂蛋白(HDL)中的载脂蛋白A激活后,将卵磷脂β位的脂酰基直接转移给HDL中的未酯化的胆固醇,形成酯键,使胆固醇酯化,同时卵磷脂变为溶血磷脂

酯化胆固醇,对脂蛋白的运输和代谢有重要作用。HDL颗粒表面有丰富的卵磷脂,LCAT的直接作用是将HDL中的胆固醇酯化。血浆和组织中的胆固醇经酯化后,由HDL将胆固醇酯运送至肝脏而被水解。测定LCAT尚无理想的方法,现用的有以下几种。酶学法:用胆固醇氧化酶测定血浆37℃温育前后未酯化胆固醇的变化。未酯化胆固醇经胆固醇氧化酶的作用,生成 ⊿
4-胆固醇和过氧化氢,在过氧化氢酶的作用下,过氧化氢将甲醇氧化甲醇为甲醛,甲醛和乙酰丙酮反应呈微黄色,在405nm处测其光密度,计算酶的活性。放射性核素法: 使
14C或
3H标记的胆固醇与底物(待检血浆)脂蛋白中的胆固醇达到平衡后,进行酶反应,一定时间后,测胆固醇酯部分的放射活性。Zark法: 分别提取和测定温育前后未酯化胆固醇和胆固醇酯,LCAT活性用胆固醇酯生成速率表示。正常值: 男性平均初速是每毫升血浆76~133mmol/h,女性平均初速44~77mmol/h。家族性LCAT缺乏症者血浆中缺乏LCAT,脂蛋白代谢紊乱,未酯化胆固醇与卵磷脂浓度增高,许多组织均有未酯化胆固醇蓄积。临床表现角膜混浊、贫血和蛋白尿,血浆脂蛋白含量异常,末梢血片出现靶形红细胞,红细胞中非酯化胆固醇与卵磷脂增加。红细胞生成缓慢而破坏加速。这些异常变化与脂类在骨髓和肾脏中蓄积有关。冠心病和Ⅱ型高脂血症病人,LCAT的初速活性可见下降。