血小板功能检查

血小板具有粘附、聚集作用和释放止血、凝血、血管活性物质及营养并维护毛细血管完整性等多种功能。但可供临床实用的标准的功能检查方法并不多，常用的有以下几种：
血小板形态检查 观察血小板形态对诊断因血小板异常引起的出血性疾病有一定价值。正常血小板呈圆盘状（圆或类圆），直径2～3μm。因易于破碎，故涂片上有时形态不规则，少数可呈不规则的星状或梭形，边缘不整齐，常有1～3个伪足突起。胞浆为透明蓝色，浆中有较多的紫红色颗粒。大型血小板(>3.4μm)占11.1%，中型血小板(2.1～3.3μm)占67.5%，小型血小板(<2.0μm)占21.4%。血小板离体后，由于接触面性质、抗凝剂种类、涂片厚薄，以及固定染色不一等条件，均能影响其形态，故涂片上所见到的并不完全是它在血液循环中的形态。血小板形态异常主要表现为大小、颗粒的形态及胞浆染色的异常。Bernard-Soulier综合征的血小板可如淋巴细胞样，直径达8μm，且有聚集功能障碍。血小板无力症、血小板减少性紫癜及白血病等血小板形态也可异常。
血小板粘附试验 血小板和玻璃表面接触后一部分即粘附于其上，比较接触前后的血小板数目变化，即可计算血小板粘附率。血小板粘附率降低见于血小板无力症、血管性假血友病等先天性血小板疾病、原发性血小板增多症、尿毒症和肝硬变等；血小板粘附率增加可见于糖尿病和脾切除后等。
血小板粘附试验常用的是玻璃珠管法和玻璃滤器法。玻璃珠管法是以枸橼酸钠抗凝的血液，按6～10ml/min速率，约用20s通过9cm长，内径为3mm的硅塑料管，管内装0.5mm直径、共重1.5g的小玻璃珠，这样，大量的血小板就会粘附在小玻璃珠上。可按下式计算血小板粘附率。

正常值为24～65%，平均37%。
玻璃滤器法是以枸橼酸钠抗凝的血液，通过特定的玻璃滤器，其滤板厚0.3cm，直径3.5cm。按上式计算出血小板粘附率。此法正常值为26～34%，平均30%。
血小板聚集试验 血小板膜上存在着二磷酸腺苷(ADP)受体，ADP可使血小板聚集，向富血小板血浆中加入ADP后，如血小板功能正常，则能迅速地聚集成细小颗粒，当将ADP加到一定浓度时则可出现团块，是为血小板的第二次聚集。血小板聚集程度，可通过肉眼、显微镜或聚集仪来观察。
简单的试验方法是在富血小板血浆0.2ml中加10μmol/L ADP 0.1ml，摇匀后开始计时，在黑色背景下，用肉眼观察有无聚集现象。如1min后尚看不到凝块，则取一滴混合液在显微镜下观察其聚集程度。正常人，加入ADP后，10～15s内即产生聚集。用于血小板聚集的诱导剂除ADP外，尚有肾上腺素、胶原、凝血酶和瑞斯托霉素(Ristocetin)。以ADP最常用。ADP诱导剂聚集与血小板数、ADP最适浓度和钙离子浓度有关。正常人群中产生第二波者约70～80%，所以ADP聚集法不正常者可再用肾上腺素等诱导剂比较对照。血小板无力症时，以任何浓度的ADP或其他聚集诱导剂，都不能使血小板聚集。血小板聚集增加，见于手术后、糖尿病、心肌梗塞等。血小板聚集减退或消失，见于多种先天性血小板功能缺陷和尿毒症、肝硬变、肿瘤等。进行本试验时应空腹，试验前8h不能吸烟，试验前一周不可服阿斯匹林及含有阿斯匹林成分的药物。其他如保泰松、抗组胺药等，对血小板凝聚也有影响，试验前48h不应服用。
血小板第3因子利用试验 血小板第3因子是形成凝血活酶的必要成分。但只有当血小板受一定刺激发生变化后，才能使其磷脂变成参与凝血的有效成分。此试验是将正常人和患者的贫血小板的血浆(PPP)和富血小板血浆(PRP)相互组合，以白陶土为刺激剂，加钙后测定凝固时间，并比较各组凝固时间的差异即得知患者血小板是否存在缺陷。本试验异常多见于血小板无力症、尿毒症、慢性肝病、骨髓增生症、巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤、急性白血病和系统性红斑狼疮等。试验方法是制备正常人与患者的PPP和PRP，各管加0.1ml，按下列组合：

组别	PPP	PRP
1 2 3 4	正常人 患者 正常人 患者	正常人 正常人 患者 患者

各管全部置于37℃水浴，依次加入4%白陶土悬液0.2ml，充分混匀20min后，再依次加入0.035M氯化钙0.2ml，立即按秒表测定凝固时间。结果观察： 第1和第3组之差>5s，表示血小板第3因子利用存在缺陷；第1和第2组之差>5s，则表示存在凝血缺陷。当第2和第3组凝固时间差>5s时，可再做血小板第3因子利用指数。方法是将正常人PRP用其自身的PPP作一系列稀释，计数血小板，按上法操作步骤加入白陶土悬液和氯化钙溶液测定凝固时间，以血小板数为横坐标，凝固时间为纵坐标画曲线。由曲线查得被检PRP凝固时间相当于正常人PRP的血小板数。血小板第3因子利用指数为患者PRP凝固时间相当于正常人PRP血小板数除以患者PRP血小板数。正常人血小板第3因子利用指数>25%。
血块退缩时间 血液完全凝固后，由于血小板释放血栓收缩素的作用，纤维蛋白网发生收缩，将网隙中血清挤出，出现血块退缩。若其它因素条件完全一致，则血小板对纤维蛋白的作用是血块退缩的唯一原因，故本试验主要是检查血小板的功能。常用的方法是取静脉血2ml放试管内，置37℃水浴中，经1/2h、1h、24h，观察血块退缩情况。部分退缩指血块已收缩但不坚实，且有一部分粘附管壁，有部分血清析出；完全退缩指血块坚实，脱离管壁，有相当于总血量40～50%的血清析出。正常值30～60min呈部分退缩，24h完全退缩。血块退缩不良指在上述时限内血块退缩未达到上述标准，血块略有收缩仅少量血清出现于管底或血块边缘。
血块退缩同血小板的数量和功能直接有关。血小板<50,000/μl或其数虽正常但功能不全时都可使血块退缩不良。血块退缩不良见于严重血小板减少性紫癜、低纤维蛋白原血症、纤维蛋白溶解症、凝血因子ⅩⅢ缺乏等。