荧光显微镜fluorescent microscope

用来观察荧光物质存在和分布的特种显微镜。
基本原理 某些物质受到紫外光或蓝紫光等短波光照射后，可发出波长较长的可见光。用以照射的短波光称激发光，所产生的可见光称荧光。功率强大的激发光源发射出紫外光及可见光，经过激发滤片除去长波光，剩下特定波长的短波光照射样品。样品中的荧光物质受短波光激发而发出荧光后，进入物镜，经保护滤片除去混杂在其中的紫外光，最后通过目镜被观察到（见图）。

落射式荧光显微镜光路图

1. 激发光源； 2. 吸热滤片；3. 激发滤片；4. 反光镜； 5.物镜； 6. 样品； 7. 保护滤片； 8. 目镜； 9. 眼或相机

照明形式 有透射和落射两种。透射式短波光自下而上透过样品，由于大量短波光与荧光一同进入物镜，故必须设置很厚的保护滤片，从而使观察到的荧光强度大为减弱。如采用暗视野透射式，其短波光是斜向照射样品而不是直接进入物镜，故可用较薄的保护滤片，且可加强激发光的强度，因此所观察到的荧光较强。落射式光路短波光从物镜自上而下照射样品，除激发滤片和保护滤片外还设有一个双向反光镜，可让长波光透过而让特定波长的短波光发生反射，从而一方面可以让来自激发光的长波光穿过并被镜筒吸收，另一方面可将来自样品的荧光中所混杂的短波光反射掉，因此激发滤片和保护滤片都可以很薄。
结构特点 成像原理及构造与普通光学显微镜基本相同，仅增加了激发滤片、保护滤片、吸热滤片等部件，由于需要大功率的短波激发光，其光源常用超高压汞灯； 因须透过紫外光，透镜等光学部件要用石英材料制成。
激发滤片和吸热滤片 激发滤片亦称第一滤片，其作用是滤除来自激发光源的长波光，否则标本所激发产生的微弱荧光会被这些光线所淹没。不同的荧光物质常需不同波长的短波光线才会有效地激发出荧光，因此每台荧光显微镜一般配有不同型号的激发滤片，可供所观察荧光物质的不同选用。在带有双向反光镜的荧光显微镜，其所反射的短波光的波长也可以调节。由于激发光源同时发射大量红光及红外光，故在光源前增加一个吸收红外线的滤片，称吸热滤片，以吸收热量。
保护滤片 亦称第二滤片或抑制滤片，其作用是除去混杂在荧光中的短波光，以保护观察者的眼睛免受紫外光损害。保护滤片也有若干型号，常与所选择的激发滤片匹配使用。
应用 用于研究动植物细胞组织内自发荧光物质的存在、分布及功能； 利用某些荧光物质对细胞或组织某些特殊结构或物质的亲和性，用荧光染色的方法显示这些结构或物质，如吖啶橙与DNA结合产生绿色荧光，与RNA结合产生桔黄色荧光； 用特定的荧光素标记特异性抗体可以检测动植物组织或细胞的特异抗原，亦可鉴别微生物，这一技术在医学生物学领域具有非常广泛的用途（见荧光抗体技术）。

荧光显微镜fluorescent microscope

用来观察荧光物质的存在和分布的特种光学显微镜。通常用紫外光、紫光或蓝光照射标本，激发标本内的荧光物质产生各种不同颜色的可见光，以观察标本内一些物质的性质和位置。与普通光镜相似，但带有保护滤光片和紫外光光源。紫外光发生装置通常是高压汞灯或氙灯。由于紫外光的波长比可见光波长要短一半，其分辨力比可见光显微镜增加一倍。用于研究细胞组织内自发荧光物质存在、分布及功能；利用某些荧光化合物对某些特殊结构或物质进行染色，可以显示这些物质或结构；用特定的荧光染料标记特异性抗体可以检测动植物组织或细胞的特异抗原，亦可鉴定微生物。

荧光显微镜yingguang xianweijing

利用一定波长的光使标本受激发产生荧光，再通过物镜和目镜系统加以放大的显微镜。在荧光显微镜中看到的不是标本的本来颜色，而是标本所发出的荧光颜色。其光源的作用不是直接照明，而是作为一种激发荧光的能源。光源所发的光通过滤光系统，以保证给标本提供特定波长的激发光，例如紫外光、紫光、蓝光或绿光。光源常用超高压汞灯、溴钨灯或白炽灯。在标本和观察者眼睛（或其它受光器）之间亦有滤光系统，以保证荧光通过，而滤去激发光。普通光学玻璃能透过300纳米以上的长波紫外光和可见光，因此，一般荧光显微镜的光学元件可用普通光学玻璃制作。只有当标本必须用短波紫外线激发时，才需用石英玻璃或特种玻璃做聚光器和反射镜等光学元件，这时载片也必须是特制的。荧光显微镜的特点是发现目标快，鉴别容易，眼睛不易疲劳，灵敏度高，对比度好。并且标本制作容易，还能进行活体观察。但有时因荧光亮度不足，观察比较困难。

荧光显微镜fluorescence microsoope

系一种特殊类型的显微镜。以短波光线，如紫外线、蓝紫光为光源，观察能自身产生荧光或用荧光染料标记的标本。此种检查可对特定抗原、抗体、免疫复合物及细胞中某些成分的定性、定位观察，在科学研究与临床诊断中有重要意义。

荧光显微镜fluorescence microscope

是以短波光线(例如紫外光、蓝紫光)为光源，观察微小物体荧光现象的显微镜。用以观察自发性荧光和继发性荧光(如荧光抗体、荧光染色)。

荧光显微镜

荧光显微镜是观察标本内荧光物质发出的自发性荧光，或某些物质用荧光色素染色后，经短光波光线照射所呈现出的继发性荧光的一种光学仪器。
荧光显微镜的特点是以短波长的紫外线或蓝紫光作光源。标本之所以能够看到，不是由于光源的照明，而是由于标本内的荧光物质吸收光能后呈现的荧光现象所致。某些物质在光线的照射下，能够吸收光能，进入新的能量状态，称为“激发态”。当从“激发态”回到原来的基态时，可以将吸收的能量再以辐射的形式放射出来。物质的这种辐射现象叫做发光（光致发光）。所以说光实质上是物质的原子或分子向外辐射出来的电磁波。荧光是光致发光的一种现象。
引起荧光的最有效的光线是紫外线或蓝紫光(波长越短，光能越强)，当荧光物质吸收这部分光能后成为“激发态”，由“激发态”重新回到“基态”之前，它的一部分能量作为热能被丢失，所以释放出的光较“激发光”的波长为长（能量较低），即释放出的光向光谱的红端偏移。
荧光显微镜的光源为高压汞灯或氙灯，这种光源可在最小的面积内发出大量的短波光线。此外，荧光显微镜有两种主要滤片。
❶激发滤片：安装在光源和显微镜之间，吸收可见光，允许一定波长的短波光通过，作为荧光显微镜的激发光源；
❷阻断滤片： 安装在目镜和物镜之间，吸收视野内多余的短波光，保护观察者的眼睛（见图）。

荧光显微镜的光路和主要部件

1.汞灯 2.反光镜 3.集光器 4.吸热滤片 5.视野光栅6.激发滤片7.反光镜 8.孔径光栅 9.集光器 10.标本 11.物镜12.视野内未转化为荧光的激发光13.目镜14.阻断滤片

荧光显微镜可以观察物质的自发性荧光(例如肝细胞的维生素A经短波光的照射可发出消退性的绿色荧光)，和观察用荧光色素染色后各种物质的继发性荧光及用荧光抗体染色的各种标本。它是应用于荧光细胞化学和免疫荧光术中的重要光学仪器。

荧光显微镜fluorescence microscope

荧光显微镜系以紫外光源，来激发荧光使之成为可见光。用特殊的荧光色素将细菌染色，置于荧光显微镜下，即可在暗视野中显现出荧光闪烁的细菌。荧光显微镜还广泛应用于免疫荧光技术中。