精子活力定量试验

精子活力定量试验是指在进行某些测定精子活力的试验时，人为地制定一些具体的计量标准，以判断与比较精子的活动能力。目前，已开展应用的有如下几项。
精子直线前向运动速度试验 (Casares和Batella法) 1955年Casares和Botella提出根据精子前向运动速度而定的生育力指数。表示男子生育力指数，M是活动精子的百分率，N是每毫升精子的数目，V是精子在葡萄糖液中30分钟的前向运动速度，A是畸形精子的百分率，109是常数。正常男性生育力指数为1～2，完全不育者生育力指数等于0，如生育力指数于0.1～0.9表示生育力低下。
这几项指标中，M、N、A都可通过一般精液常规检查测得，V项要采取以下方法测定： 用一根长10cm，直径1.2mm的毛细玻璃管，管内充满等渗己糖溶液，也可用葡萄糖、果糖或半乳糖代替。将玻璃管置于底部含有一滴精液的玻璃管内，并保留在恒温器内30分钟，然后将玻璃管置于显微镜下观察精子前向运动，并测定精子前向运动的最远距离，即表示精子在30分钟内的运动速度。
精子穿透试验 Botella-Unsia (1966)创用另一种精子前向运动的试验，方法是取一副容量为1ml的针筒，抽取0.2ml葡萄糖液或子宫颈粘液，针筒头部套上一根2cm长的细管，管内也充满葡萄糖液或子宫颈粘液，将针筒与细管一起插入一根试管内，试管的底部置有一滴精液，要求针筒前端的细管与精液接触，然后保持于37℃恒温箱内2小时，拔除细管，将针筒内0.2ml容量的葡萄糖液或子宫颈液置于计数板上，计数内中的精子数。一般有生育能力的精子，具有良好的穿透性，能计数到不少精子，该试验便为阳性；没有生育能力的精子，不具有穿透性，计数不到精子，该试验阴性。
体外精子穿透宫颈粘液试验 Ruiz-Velasco (1962)分别用不育症者妻子的子宫颈粘液和有生育能力的宫颈粘液充满精子穿透试验的测试针筒，分别用丈夫的精液及有生育能力的男子精液进行精子穿透试验，这种试验又称为体外精子穿透宫颈粘液试验。从图所示，先用丈夫精液与妻子的宫颈粘液作穿透试验(I)，若为阳性，说明丈夫的精子能穿过妻子的宫颈粘液，则应寻找其他不育因素。若为阴性，则应进一步用妻子宫颈粘液和正常精液(II)以及丈夫的精液和正常的宫颈粘液(III)作精子穿透试验，当丈夫精液精子能穿透正常宫颈粘液而正常精液精子不能穿透不育妻子的宫颈粘液者，不育原因属女方因素。当丈夫精液精子不能穿透正常宫颈粘液而正常精液精子能穿透不育妻子的宫颈粘液者，不育原因属男方因素。以上二种穿透试验都阴性者为双方因素引起不育。

精子穿透试验

体外精子穿透宫颈粘液试验

塑料管精子营养液爬高试验 参照Botella-Casares测量体外精子爬高运动的方法，用塑料管精子营养液穿透来测量精子的活力，是一种比较客观的试验。方法是取一根上端封闭的塑料管，内径为0.2cm，长约10cm，管内充满精子营养液 (营养液配方： NaCl 7.721g、KCl0.372g、果糖1g、KH2PO40.136g、MgSO₄·7H₂O 0_.247g、Na2HPO4 3.581g、蒸馏水加到1000ml)。将其垂直放入内有0.5ml精液的试管内，置37℃恒温水浴箱中，4小时后取出，再置入冰箱的速冻箱内待管内液体冻成冰柱后取出，室温中融化后，自下而上逐段剪取1cm长的塑料管，用血球计数板计算每段塑料管充液之0.1mm²内的精子数及精子爬高的最高厘米数。也可不经过冰冻步骤对塑料管内的精子逐段计数。一般健康精子可爬高到5cm，如低于3cm则为不正常。
这种检查方法可受到一些因素干扰的影响，主要有
❶精子密度、活力及精液粘稠度。
❷塑料管内精液营养液的成分及pH等。
❸操作方法，如塑料管的孵化过程中温度，湿度变化及塑料管的消毒处理。
❹孵化时间长短等。采用冰冻过程者这些影响因素更为复杂，所以，要制定统一的标准，否则不能比较。总之，这些试验不仅能观察精子前向运动和穿透情况，而且也阐明了精子在女性生殖道前向运动的一些问题。许多观察说明，精子在女性生殖道内前向运动所以比体外运动速度快，是由于子宫的收缩促使精子上升的作用加快。并且认为，宫颈起着滤过精液的作用，能挡住精液中病理型的精子，宫颈粘液不仅是理化作用，且有子宫颈的生物特性。因此对精子动力学的研究不单是对精液的估价测定，而且可以阐明宫颈粘液的适应特性以及精子在女性生殖道内上升的一些问题。

精子爬高试验