病毒战剂分离

病毒战剂分离是判断标本中是否含有病毒战剂的初步检验程序。收到标本后，应立即登记，在无菌条件下，将标本酌情分出一部分冻存，将其余部分进行以下处理：研磨 如为固体标本(昆虫、脏器、组织、枝叶等)，应在无菌条件下进行研磨或剪碎，加入适量稀释液，制成约为10^-1浓度的液体标本。
除菌 将液体标本进行除菌处理，于待检液体标本中加入适量除菌药液，放置4℃至少2小时，然后方可进行标本接种。常用的除菌药物有青霉素、链霉素、两性霉素B，卡那霉素等。使用浓度以对宿主系统无毒害为原则。接种 将经过除菌处理的液体标本分为2份，一份冻存，另一份按下表所示接种于各种宿主系统中。接种完

几种分离病毒战剂的宿主系统

宿主系统	接种法	可能分离的主要病毒战剂
Vero细胞或 CV-1细胞	常规法	马尔堡病毒、伊博拉病 毒、拉沙病毒、裂谷热病 毒、天花病毒、披膜病毒科 病毒
白纹伊蚊细 胞C6/36株或 AP-61细胞	常规法	登革病毒、黄热病病毒
1～3日龄乳鼠	脑内加腹腔	披膜病毒科病毒、拉沙 病毒、伊博拉病毒、裂谷热 病毒
25～30日龄小鼠	脑内	披膜病毒科病毒、拉沙 病毒、伊博拉病毒、裂谷热 病毒
250～300克豚鼠	腹腔	马尔堡病毒、伊博拉病 毒、拉沙病毒
11～13日龄鸡胚	绒毛尿 囊膜法	天花病毒

毕所剩余的待检标本，可检查有无细菌、真菌。接种后，应密切观察宿主系统的反应，如细胞培养是否出现细胞病变或空斑，动物是否发病，鸡胚是否死亡或胚膜是否出现病灶等。如出现上述反应，必须立即收取这些病毒材料，冻存一部分，另一部分用适量稀释液 （内含上述除菌药液）制成约10^-1浓度的液体标本，再按表所示重复作标本接种（传代）。并按同法至少再传代一次，如每次传代宿主系统均能规律地出现上述反应，则可认为已分离出一种可能是病毒的致病因子，应接着进行病毒战剂鉴定。如首次接种后不出现上述反应，至少应再盲目传代2次。如仍不出现反应，可认为未分离出表中所示的病毒战剂。