小球藻法chlorella method

利用小球藻体内叶绿素含量与某些除草剂浓度负相关的原理，来比较药剂活性的除草剂生物测定方法。常用于比较光合抑制剂的活性。
其方法是： 将单细胞小球藻(Chlorella vulgais)原液或藻种接种在培养液[每升含尿素0.2克、磷酸氢二钾(K₂HPO₄·3H₂O)0.5克、硫酸镁(MgSO₄·7H₂O)0.1克、酵母提取液10毫升、2%柠檬酸铁溶液1毫升]中。25～30℃、2000～3000勒日光灯下培养至旺盛生长(透光率为40～50%)。在50毫升的三角瓶中，放入8毫升培养液、10毫升藻液和2毫升待测液。每个处理重复三次。瓶口用双层纱布盖好。为使每瓶内藻液及细胞数含量一致，藻液应事先经四层纱布过滤，吸取时应不断摇动。在上述条件下培养24小时。其间，应定时摇动三角瓶，以补充空气，防止藻液沉淀。培养终止时，每个三角瓶摇匀后取10毫升培养物，4000转/分离心10分钟，弃去上清液。加入10毫升甲醇，1～5℃黑暗条件下放置24小时提取叶绿素，定容后在665纳米波长下测透光率。由透光率查表求出叶绿素含量，并计算出IC50值。
应注意以下三方面： ❶ 许多类型的除草剂对小球藻生长均有影响。其中，对取代脲类、三氮苯类及杂环类除草剂最为敏感。氨基甲酸酯、酰胺、腈类次之，苯氧羧酸及醚类则基本无活性，不能用此法测定；
❷试验过程中光照度应一致。在一定范围内，光照度加大时，药效出现快；
❸选择配药溶剂时，除考虑溶解度之外，还应尽量减少对小球藻生长的影响。以甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺较为常用。乙醇、环己酮对生长不利。乳化剂、可湿性粉剂对试验有干扰。