亲和色谱法

亲和色谱法是利用生物分子间具有专一性亲和力的生物分子对而设计的色谱技术。如酶的活性中心能与专一的底物、抑制剂、辅助因子以及效应剂通过次级键可逆地结合。其他如抗体与抗原、RNA与DNA、激素与其受体、外源凝集素与细胞膜等体系均有类似特性。因此选择好亲和物就可将某一生物分子有选择性地与其他物质分离，所以又称生物选择性吸附法。
操作时一般先将亲和物（配基）以共价键结合于一种不溶性的聚合物（载体）上，填充在色谱柱内，常用载体有葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、纤维素、聚丙烯酰胺凝胶等。为减小空间障碍、提高吸附效率，有时需在配基与载体之间连入有一定长度的烃基，称为“手臂”，使配基可伸出，以有较大的活动余地。制备好的这种固定相填充在色谱柱内，使被分离的蛋白质通过色谱柱，由于蛋白质分子上的活性中心与亲和物相结合而被滞留，其他蛋白质分子无阻滞地流出得到分离。然后改变洗脱剂的pH值、离子强度等，即可使被分离的蛋白质分子释出，达到分离纯化的目的。此法在制备高纯度生化制剂中得到较多应用。