DNA缺口平移标记法DNA nick translation marking

是目前最常用的一种DNA探针标记法。利用适当浓度的DNase I在DNA双链上随机切割单链，造成单链切口。切口处产生一个5′末端和一个3′末端，3′末端即可作为引物，在大肠杆菌DNA聚合酶I的5′→3′ DNA聚合酶活化的催化下，以互补的DNA单链为模板，依次将 dNTP连接到切口的3′端羟基上，合成新的DNA单链；同时DNA聚合酶I的5′→3′核酸外切酶活性在切口处将旧链从5′末端逐步切除，新合成链不断延伸，从而使原DNA分子上的部分核苷酸残基被标记的核苷酸取代。DNaseI是在两条链的不同部位打开缺口的，因此两条链均可被均匀地标记上，使被标记的DNA达到较高的标记效率，此法标记化合物的掺入率可达20%～30%。